當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>大鼠elisa檢測試劑盒原理與方法。
大鼠elisa檢測試劑盒的原理:
利用Cre/LoxP 和來自酵母的FLP-frt 系統(tǒng)可以研究特定組織器官或特定細(xì)胞中靶基因滅活所導(dǎo)致
的表型[7]。通過常規(guī)基因打靶在基因組的靶位點(diǎn)上裝上兩個(gè)同向排列的1oxP,并以此兩側(cè)裝接上
loxP 的(“loxP floxed”)ES 細(xì)胞產(chǎn)生“loxPfloxed”小鼠,然后,通過將“loxP floxed”小鼠與Cre
轉(zhuǎn)基因鼠雜交(也可以其他方式向小鼠中引入Cre 重組酶),產(chǎn)生靶基因發(fā)生特定方式(如特定的組織特
異性)修飾的條件性突變小鼠。在“loxP floxed”小鼠,雖然靶基因的兩側(cè)已各裝上了一個(gè)loxP,但
靶基因并沒有發(fā)生其他的變化,故“1oxP noxed”小鼠表型仍同野生型的一樣。但當(dāng)它與Cre 轉(zhuǎn)基
因小鼠雜交時(shí),產(chǎn)生的子代中將同時(shí)帶有“loxP floxed”靶基因和Cre 基因。Cre 基因表達(dá)產(chǎn)生的
Cre 重組酶就會介導(dǎo)靶基因兩側(cè)的1oxP 間發(fā)生切除反應(yīng),結(jié)果將一個(gè)loxP 和靶基因切除。這樣,靶
基因的修飾(切除)是以Cre 的表達(dá)為前提的。Cre 的表達(dá)特性決定了靶基因的修飾(切除)持性:即Cre
在哪一種組織細(xì)胞中表達(dá),靶基因的修飾(切除)就發(fā)生在哪種組織細(xì)胞;而Cre 的表達(dá)水平將影響靶基
因在此種組織細(xì)胞中進(jìn)行修飾的效率。所以只要控制Cre 的表達(dá)特異性和表達(dá)水平就可實(shí)現(xiàn)對小鼠中
靶基因修飾的特異性和程度。
大鼠elisa檢測試劑盒方法;
誘導(dǎo)性基因敲除也是以Cre/loxp 系統(tǒng)為基礎(chǔ),但卻是利用控制Cre 表達(dá)的啟動(dòng)子的活性或所表達(dá)的
Cre 酶活性具有可誘導(dǎo)的特點(diǎn),通過對誘導(dǎo)劑給予時(shí)間的控制或利用Cre 基因定位表達(dá)系統(tǒng)中載體的
宿主細(xì)胞特異性和將該表達(dá)系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到動(dòng)物體內(nèi)的過程在時(shí)間上的可控性,從而在1oxP 動(dòng)物的一定
發(fā)育階段和一定組織細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)對特定基因進(jìn)行遺傳修飾之目的的基因敲除技術(shù)。人們可以通過對誘
導(dǎo)劑給予時(shí)間的預(yù)先設(shè)計(jì)的方式來對動(dòng)物基因突變的時(shí)空特異性進(jìn)行人為控制、以避免出現(xiàn)死胎或動(dòng)
物出生后不久即死亡的現(xiàn)象。常見的幾種誘導(dǎo)性類型如下:四環(huán)素誘導(dǎo)型;干擾素誘導(dǎo)型;激素誘導(dǎo)型;
腺病毒介導(dǎo)型。
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