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當(dāng)前位置：上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>骨骼肌細(xì)胞純化的具體辦法
骨骼肌細(xì)胞的貼壁速度比非肌源性細(xì)胞慢，為此，可以用差速貼壁法取得較高純度的肌源性細(xì)胞。具體辦法是：
1．取原代培育早期的細(xì)胞(培育30~40h)，經(jīng)洗刷后，用0．25%的胰蛋白酶溶液消化。細(xì)胞開端脫壁時(shí)以馬血清停止消化。
2．搜集脫壁的細(xì)胞，洗刷后用培育液制備成細(xì)胞懸液。
3．當(dāng)即接種到另一培育板上，貼壁40min。此時(shí)，大都非肌源性細(xì)胞現(xiàn)已貼壁，而骨骼肌細(xì)胞仍懸浮在培育液中，或沉降到培育板上但未貼壁。
4．吸出未貼壁細(xì)胞，計(jì)數(shù)后將細(xì)胞調(diào)至所需細(xì)胞濃度，進(jìn)行接種。
5．接種后，骨骼肌細(xì)胞純度可到達(dá)90％以上。該辦法亦可用于直接經(jīng)胰蛋白酶溶液消化的肌肉組織細(xì)胞。
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