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中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO-rFVIII-11說(shuō)明
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO-rFVIII-11品牌凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株,其中絕大部分是近年來(lái)從美國(guó)ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子,少部分來(lái)自全國(guó)各地細(xì)胞研究所,細(xì)胞來(lái)源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO-rFVIII-11品牌操作步驟:
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
(-)-(S)-Cathinone (hydrochloride) (exempt preparation) (1 mg)2-ami-phenyl-1-propanone, monohydrochloride
4-Hydroxyalprazolam (5 mg)8-chloro-1-methyl-6-phenyl-4H-[1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]benzodiazepin-4-ol
TZ9 (10 mg)4-amino-6-(phenylamino)-2-(4-nitrobenzoate)-1,3,5-triazine-2-methanol
SDB-006 N-phenyl analog (1 mg)1-
5-Octyl D-glutamate (10 mg)5-Octyl ester D-glutamatic acid; 5-octyl ester D-glutamic acid
CH 223191 (5 mg)1-
7,8,9,10-Tetrahydrobenzo[a]pyren-7-ol (1 g)7-HTBP|NSC 30871; 7,8,9,10-tetrahydro-benzo[a]pyren-7-ol
SRPIN340 (1 mg)SRPK Inhibitor; N-
Peracetylchitobiose (100 mg)Chitobiose octaacetate; 2-(acetylamino)-2-deoxy-4-O-[3,4,6-tri-O-acetyl-2-(acetylamino)-2-deoxy-β-D-glucopyranosyl]-D-glucopyranose-1,3,6-triacetate
Biotin-HPDP (10 mg)(3aS,4S,6aR)-hexahydro-2-oxo-N-[6-[[1-oxo-3-(2-pyridinyldithio)propyl]amino]hexyl]-1H-thieno[3,4-d]imidazole-4-pent*
Oleandomycin4-Methylumbelliferyl α-D-galactoside; 7-(α-D-galactopyranosyloxy)-4-methyl-2H-1-benzopyran-2-one
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO-rFVIII-11品牌人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞SHG-44 (人膠質(zhì)瘤細(xì)胞)
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
異常漢遜酵母 Hansenula anomala毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
鐮刀菌 Fusarium sp.放射形土壤桿菌 Agrobacterium radiobacter
小鼠腎足突細(xì)胞*培養(yǎng)基6T-CEM (人T細(xì)胞白血病細(xì)胞)
費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii挪威假絲酵母 Candida norvegensis
NCI-H358(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)根瘤菌 Rhizobium sp.gersion
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaePANC-1, 人胰腺細(xì)胞
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis赭曲霉 Aspergillus ochraceus
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞雙孢蘑菇 Agaricus bisporus
大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae小鼠食管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii植物桿菌 Lactobacillus plantarum
MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14)費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO-rFVIII-11品牌
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