【儀表網(wǎng) 儀表標(biāo)準(zhǔn)】20 世紀(jì)末，Vogelstein 等提出數(shù)字PCR( digitalPCR，dPCR) 的概念，通過將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬份，分配到不同的反應(yīng)單元，每個(gè)單元至少包含一個(gè)拷貝的目標(biāo)分子( DNA 模板) ，在每個(gè)反應(yīng)單元中分別對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行PCR 擴(kuò)增，擴(kuò)增結(jié)束后對(duì)各個(gè)反應(yīng)單元的熒光信號(hào)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
 

　　近年來隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，各實(shí)驗(yàn)室數(shù)字 PCR 儀數(shù)量迅速增加，這些儀器除了被用于基礎(chǔ)科研外，還被廣泛地用于第三方醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室、出入境和疾控中心的樣品檢測。根據(jù)《ISO/IEC 17025:2005 檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求》，檢測校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)中使用的分析設(shè)備都應(yīng)當(dāng)經(jīng)過檢定或校準(zhǔn)，以保證儀器的準(zhǔn)確性和測定結(jié)果的可溯源，從而保證各個(gè)檢測和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室在不同時(shí)間、不同地點(diǎn)測定結(jié)果的準(zhǔn)確、可比。
 

　　但是，數(shù)字 PCR 儀由于沒有檢定規(guī)程或者校準(zhǔn)規(guī)范，無法對(duì)儀器進(jìn)行檢定校準(zhǔn)，已經(jīng)成為當(dāng)前實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可工作中的瓶頸之一。通過制定數(shù)字 PCR 儀校準(zhǔn)規(guī)范，實(shí)現(xiàn)儀器的校準(zhǔn)，可以保證數(shù)字 PCR 儀出具檢測報(bào)告的準(zhǔn)確有效。
 

　　因此，我國由全國生物計(jì)量技術(shù)委員會(huì)對(duì)口負(fù)責(zé)的《數(shù)字PCR儀校準(zhǔn)規(guī)范》征求意見稿已經(jīng)起草完成。望在百忙之中進(jìn)行評(píng)審并提出意見。請(qǐng)將意見寄(或發(fā)電子郵件) donglh@nim.ac.cn。給全國生物計(jì)量技術(shù)委員會(huì)秘書處。
 

　　《數(shù)字PCR儀校準(zhǔn)規(guī)范》的編制依據(jù)基于對(duì)數(shù)字PCR儀主要技術(shù)參數(shù)測試的基礎(chǔ)，依據(jù)JJF1071-2010《國家計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范編寫原則》、JJF 1059.1-2012《測量不確定度評(píng)定與表示》編制。規(guī)范的制定主要參考了JJF1527-2015 《聚合酶鏈反應(yīng)分析儀校準(zhǔn)規(guī)范》。為發(fā)布。
 

　　《數(shù)字PCR儀校準(zhǔn)規(guī)范》適用于微滴式、芯片式和微孔式數(shù)字聚合酶鏈反應(yīng)分析儀(Digital PCRAnalyzer，以下簡稱數(shù)字 PCR 儀) 計(jì)量性能的校準(zhǔn)，對(duì)于其它類型的數(shù)字 PCR 儀，可參照本規(guī)范執(zhí)行。
 

　　本規(guī)范引用了下列文件：
 

　　JJF1527-2015 聚合酶鏈反應(yīng)分析儀校準(zhǔn)規(guī)范；凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本規(guī)范；凡是不注日期的引用文件，其新版本適用于本規(guī)范。
 

　　其計(jì)量特性如下圖所示：
 

　　另外，在校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)時(shí)，實(shí)驗(yàn)室環(huán)境應(yīng)滿足儀器安裝的要求，不得存在強(qiáng)烈的機(jī)械振動(dòng)和電磁干擾，校準(zhǔn)時(shí)實(shí)驗(yàn)室溫度應(yīng)當(dāng)控制在(15~30)℃，相對(duì)濕度不大于 70%。（詳情見附件）