【儀表網(wǎng) 行業(yè)標準】近日，由國家糧食和物資儲備局組織起草的《糧油檢驗 谷物中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的測定 時間分辨熒光免疫層析法》行業(yè)標準已形成征求意見稿，現(xiàn)向社會公開征求意見，截止日期為2023年5月17日，意見反饋郵箱tc270sc1@ags.ac.cn。
 

　　脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(Deoxynivalenol，DON)，又名嘔吐毒素，主要是由鐮刀菌屬的禾谷鐮刀菌、黃色鐮刀菌等菌株產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物，主要污染小麥、玉米、大麥等，具有很強的毒性。2003 年我國對小麥、玉米、稻谷中 DON 的污染情況調(diào)查顯示，小麥、玉米 DON 污染較稻谷嚴重。我國早在 2005 年頒布了糧食和食品中 DON 的限量標準，2017 年頒布了《國家食品安全標準 食品中真菌毒素限量》規(guī)定小麥、玉米中 DON 的最高限量為 1000 µg/kg。
 

　　本標準旨在建立谷物中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的時間分辨熒光免疫層析檢測技術，用于谷物中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的快速檢測，便于基層糧庫、糧油企業(yè)以及糧食監(jiān)管部門對谷物中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的污染情況進行掌握和防控，實現(xiàn)對谷物中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的有效監(jiān)管，保障我國糧食質(zhì)量安全和人民群眾的身體健康。
 

　　本文件按照 GB/T 1.1-2020《標準化工作導則 第 1 部分:標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。參考GB 5491 糧食、油料檢驗 扦樣、分樣法；GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法；GB/T 27404 實驗室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測等文件內(nèi)容編制。
 

　　本文件規(guī)定了時間分辨熒光免疫層析法測定谷物中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的原理、試劑及材料、儀器及設備、樣品制備、樣品測定、結果表述和重復性。本文件適用于小麥、玉米等谷物中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的快速定量檢測。
 

　　原理：
 

　　試樣中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇與含銪-螯合物的聚苯乙烯微球標記的特異性抗體發(fā)生結合后，抑制了層析過程中抗體與硝酸纖維膜檢測線上脫氧雪腐鐮刀菌烯醇-BSA偶聯(lián)物的免疫反應，使檢測線上熒光強度降低，通過熒光強度變化和熒光分析儀的內(nèi)置標準曲線，自動計算出試樣中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的含量。
 

　　儀器及設備：
 

　　1.粉碎機：電機轉(zhuǎn)速 ≥ 1000 r/min。
 

　　2.分樣篩：1 mm 孔徑。
 

　　3.天平：分度值 0.01 g。
 

　　4.離心機：≥轉(zhuǎn)速 4000 r/min。
 

　　5.振蕩器：轉(zhuǎn)速 ≥ 2500 r/min。
 

　　6.計時器。
 

　　7.時間分辨熒光分析儀：在激發(fā)波長為 365 nm ± 5 nm，檢測波長為 615 nm ± 5 nm 條件下測定。
 

　　樣品測定：
 

　　1.將檢測卡(5.1)從冷藏狀態(tài)(2 ℃～8 ℃)取出，室溫平衡15min。
 

　　2.儀器校準：選取測試項目為脫氧雪腐鐮刀菌烯醇，準確移取 100 µL 脫氧雪腐鐮刀菌烯醇標準溶液(5.3)通過樣品稀釋液稀釋 10 倍后，加到檢測卡加樣小孔中，室溫孵育 10 min 后，將其放入時間分辨熒光分析儀(6.7)中，點擊儀器主界面“測量”菜單中“標準測量”按鈕，然后按“是”按鈕進行校準。
 

　　3.樣品檢測：準確移取 100 µL 待測溶液(7.3)，加到檢測卡加樣小孔中，室溫孵育 10 min 后，將其放入時間分辨熒光分析儀(6.7)中，點擊儀器主界面“測量”菜單進行測量，即可讀取樣品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的含量。
 

　　結果表述：
 

　　試樣中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇含量由時間分辨熒光分析儀自動計算并顯示，單位為微克/千克(μg/kg)。計算結果以重復性條件下獲得的2次獨立測定結果的算數(shù)平均值表示，保留至小數(shù)點后兩位。
 

　　重復性：
 

　　在同一實驗室，由同一操作人員，使用同一儀器，按照相同的測定方法，對同一被測試對象進行相互獨立測試獲得的兩次獨立測試結果的絕對差值大于其算術平均值20%的情況不超過5%。
 

　　更多詳情請見附件。