根據(jù)中華人民共和國*部GA/T842-2009行業(yè)標準及2011年5月1日起施行的新刑法規(guī)定血液中酒精含量達到80mg/100ml以上即為醉酒駕車,我公司按照2011年5月1日起施行的新刑法規(guī)定研發(fā)推出的型GC2020頂空-氣相色譜儀(血液中酒精檢測儀)
頂空進樣器與氣相色譜儀工作原理及優(yōu)點:
啟動后按設定值自動完成加熱樣品;進針;充壓平衡;取樣;樣品充入定量管;六通閥切換進樣;啟動工作站開始采樣記錄等工作.
分析是通過樣品基質上方的氣體成分來測定這些組分在原樣品中的含量.顯然,這是一種間接分析方法,其基本理論依據(jù)是在一定條件下氣相和凝聚相(液相和固相)之間存在著分配平衡.所以,氣相的組成能反映凝聚相的組成.我們可以把頂空分析看成是一種氣相萃取方法,即用氣體作“溶劑”來萃取樣品中的揮發(fā)性成分,因而,頂空分析就是一種理想的樣品凈化方法.傳統(tǒng)的液液萃取以及SPE都是將樣品溶在液體中,不可避免地會有一些共萃取物干擾分析.況且溶劑本身的純度也是一個問題,這在痕量分析中尤為重要.而氣體作溶劑就可避免不必要的干擾,因為高純度氣體很容易得到,且成本較低,這也是頂空GC被廣泛采用的一個重要原因.
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1 材料和方法
1.1 主要儀器 滕州中科譜GC2020型氣相色譜儀,DK-16型半自動頂空進樣器,N2000色譜工作站。
1.2 試劑 空白抗凝血,無水乙醇(色譜純),叔丁醇(色譜純,內標物)。
1.3 試劑配置
1.3.1 乙醇標準儲備液、叔丁醇標準儲備液 用移液器分別準確吸取無水乙醇1.26 ml(相對密度0.7893)、叔丁醇1.24 ml(相對密度0.803 7)于100 ml容量瓶中,用重蒸水稀釋至刻度,混勻,分別得濃度為10 g/L的乙醇標準儲備液、叔丁醇標準儲備液。置4℃冰箱保存(可保存1年)
1.3.2 乙醇標準工作液、叔丁醇標準工作液 分別吸取一定量的乙醇標準儲備液和叔丁醇標準儲備液,用蒸餾水稀釋10倍,分別得濃度為1 g/L的乙醇標準工作液和叔丁醇標準工作液
1.4 色譜條件和頂空條件 色譜柱 毛細管色譜柱,柱溫80℃,檢測室溫度220℃,進樣溫度200℃. 頂空樣品溫度80℃,閥體溫度90℃,樣品管路溫度90℃。
1.5 樣品制備 精確吸取2份待測全血0.5 ml,分別加入樣品瓶中,加100 μl(1 g/L)叔丁醇標準工作液作為內標,用密封鉗加封鋁帽,密封好瓶塞,混勻,放入DK-300頂空進樣器加熱位里面。
另取空白全血2份,根據(jù)待測血液中乙醇含量的多少(目測乙醇峰面積的大?。?,添加相應的乙醇標準工作液(20 μg~2 mg),內標液按上述方法平行操作,作為已知對照。
1.6樣品檢測 按下頂空進樣按鍵,儀器自動負壓吸取樣品進氣相色譜分析,同時頂空進樣器給色譜工作一個采樣信號,色譜工作站開始記錄色譜數(shù)據(jù)。每個試樣進樣2次。
1.7 標準曲線的制作 將10 g/L的乙醇標準儲備液用重蒸水分別稀釋10、100、1000倍,得濃度分別為1、0.1、0.01 g/L的乙醇標準液,然后分別取0.05、0.1、0.2、0.4 ml的1 g/L乙醇標準液,0.1、0.2 ml的0.1 g/L乙醇標準液,0.1、0.2 ml的0.01 g/L乙醇標準液,同時加入0.2 ml的1 g/L叔丁醇標準工作液做內標,檢測后制作標準工作曲線。見表1。
1.8記錄與計算 記錄檢材及已知對照中乙醇及內標峰面積值,填入GC定量分析記錄表中,并計算出各檢材中乙醇及內標的平均峰面積。表1 標準工作曲線相關數(shù)據(jù) 乙醇添加量理論計算的乙醇濃度根據(jù)表1的數(shù)據(jù),計算標準曲線的回歸方程及相關系數(shù):
y=1.4062x+0.0268,r=0.999
計算檢材中醇含量W(g/100 ml)
W=f×檢材中的醇峰面積平均值×內標添加量(μg)×100檢材中內標峰面積平均值×檢材量×1000
f=空白檢材中醇添加量×內標峰面積平均值空白檢材中內標添加量×醇峰面積平均值
計算相對相差(用來檢驗平行操作的穩(wěn)定性及數(shù)據(jù)的可靠性):
相對相差(%)=|W1-W2|W×100
式中W1、W2為2份檢材平行定量測定的結果,W為2份檢材平均值。
2結 果
2.1測定的色譜圖 見圖1、2。
該條件下目標峰與內標分離*,(3.39±0.5)min處為乙醇目標峰,(10.0±0.5)min處為內標峰。
2.2 線性關系 在確定的*試驗條件下,對不同濃度的乙醇標準工作液進行測定,其回歸方程為y=1.4062x+0.0268,r=0.999。在乙醇濃度為0.01~10.0 g/L范圍內,血液中乙醇含量與相應的峰面積值呈良好的線性關系,測定限為0.01 g/L。
如有需要測定血液中乙醇含量可
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