LuminMax（冷光儀,又稱:化學發(fā)光光度計、化合光以及生物發(fā)光檢測儀、化學發(fā)光儀、BL/CL分析儀）技術簡介 引 言生物發(fā)光和化學發(fā)光是自然界中一種常見現象。發(fā)光主要物質是由酵素（如：蟲熒光素酶）、受質（如：熒光素）及其輔助ATP等所組成。如未涉及細胞，ATP是不需要的。所以二種重要的化學物質是酵素和受質：若將這二者放在一起就會產生化學冷光。光強度與酵素濃度成線形關系，所以檢測光度就可定量濃度。化學發(fā)光指化學反應過程中發(fā)射出來的光，又稱冷光；生物發(fā)光是化學發(fā)光的一種，專指由酶催化的化學反應過程中發(fā)射出的光。化學和生物發(fā)光經常被用于測定樣品中未知成分的量，并且在過去的十年里在基因表達和基因調控的研究中發(fā)揮著非常重要的作用。 通過發(fā)射光的比率可以推出未知成分的濃度，因此測定化學反應過程中的發(fā)射光是非常有用的。反應過程中產生的光與發(fā)射光的量產率是直接相關的，相應的，與發(fā)光物質的濃度成比例。因此，反應過程中的光可以相對反映出目標樣品中發(fā)光物質的量。近年來，生物發(fā)光和化學發(fā)光的研究及使用與日俱增。從測試細胞活性的ATP-熒光素酶檢驗，到當今的DNA、基因及蛋白質分析的應用日益擴大。與熒光發(fā)光不同，它不需要外部光源。冷光是從化學反應所產生的。利用光子計數檢測器，通過對反應中所產生的光子計數，冷光檢驗已成為zui靈敏的光學檢測方法之一。美國Maxwell Sensors公司的LuminMax-C研究級化學發(fā)光儀（冷光儀）為廣大用戶提供了一款具有超高靈敏度和重復精度、易使用、結構緊湊及經濟實用的儀器。該儀器可測量96孔微孔板（黑或白）中的發(fā)光強度。微孔板底部很清潔，因此，從孔的底部產生的發(fā)光即可被檢測。（詳細技術規(guī)格請登錄：www.tansi.com.cn） 優(yōu) 點 • 化學發(fā)光定量檢測法相對于其它分析技術有許多優(yōu)點：非常靈敏；動力學范圍廣；儀器設備便宜；這一新的發(fā)光實驗方法的出現使得這一技術的應用非常廣泛。LuminMax-C使用了超級光電倍增管作為檢測器，它具有*的靈敏度。檢測靈敏度可達10-18 摩爾（HRP）以上。它具有檢測從反應中產生光子數的能力，這意味著它可以檢測樣品中被分析物極小的份量（濃度）。 • 優(yōu)秀的靈敏度和低背景使發(fā)光檢測儀從其它分析方法中脫穎而出。發(fā)光檢測儀比吸收光譜儀靈敏 100,000 倍，比熒光儀至少靈敏 1,000 倍。 • 在發(fā)光反應中，有兩種成分的光能夠到達檢測儀。*種與化學發(fā)光反應中的有限的反應物的濃度成比例。第二種也就是背景光，是基本不變的，與反應物中的塑料、雜質發(fā)出的磷光等有關。相對于分光光度計和熒光儀等其它檢測技術，化學發(fā)光檢測儀的背景光非常低。 • 廣泛的動力學范圍和低儀器成本也是化學發(fā)光檢測儀的優(yōu)勢。不需稀釋樣品或對樣品細胞進行修飾，測量范圍可以達到7個數量級以上的濃度。 • 使用簡單方便：具有用戶友好界面的軟件在隨機奉送的光盤里，它非常容易安裝。LuminMax-C不但體積小巧，而且通過簡單的插入式連接（USB或者串口）與計算機相連，便于攜帶。當按下“GO”鍵，系統自動并快速地掃描所有選中的微孔，并且顯示結果。計算結果以電子表格的形式顯示。數據以光子數或相對光單元（RUL）作為報告被顯示。 用 途化學發(fā)光儀經常被用于： ·ATP（三磷酸腺甙）檢驗、熒光素酶檢驗 ·免疫及proteomics ·核酸，DNA及基因組 ·病毒研究（比如：SARS、禽流感病毒研究） ·臨床診斷研究 ·染色體分析 ·毒性試驗 ·細胞活力試驗 ·餐館衛(wèi)生檢測 ·環(huán)境檢測 ·工業(yè)、農林業(yè)、畜牧業(yè)、養(yǎng)殖業(yè)等其它用途zui廣泛的用途是對利用報告基因檢測目標基因的表達以及檢測細胞內 ATP 水平。 1. 報告基因實驗：分子生物學家和細胞生物學家利用報告基因研究基因的表達和調控。將報告基因引入細胞 DNA 使之與某一特定分子事件相關，可以為這一分子事件帶來可測性。通常檢測的分子事件是基因功能，具有可測性的是發(fā)光。目前，市場上有許多發(fā)光報告基因出售。包括：螢火蟲熒光素酶（ firefly luciferase ），β－半乳糖苷酶（ B -galactosidase ），β－葡萄糖苷酸酶（B -glucuronidase ， GUS ），堿性磷酸酶（ alkaline phosphatase ），和人生長激素（ human growth hormone ， hGH ）。 高靈敏度，低成本，快速以及使用簡單使得發(fā)光檢測儀成為理想的基因表達研究工具。 2. ATP 水平測定：所有活細胞都含有 ATP 。 ATP 可以從細胞中提取出來，用螢火蟲熒光素酶檢測。在這個發(fā)光反應中，ATP 是限制性反應物。因此，到達發(fā)光檢測儀光電倍增管的光與樣品中 ATP 的含量成比例，相應的與提取 ATP 所用的細胞數成比例。ATP發(fā)光檢測方法已經使用了幾十年。ATP的測量被應用于： • 水，食物，藥品，化妝品中的微生物污染檢測：ATP的發(fā)光檢測方法可以檢測樣品中的所有微生物，因而被用于檢測水中的大腸桿菌含量，包括飲用水和用于oil field injection ， cooling system 以及紙加工過程的工業(yè)用水。ATP的發(fā)光檢測方法還可以用于藥品，化妝品，牛奶以及其它食品的微生物控制。 • 生物數量評估： 微生物學家通過檢測 ATP 的含量測定土壤和沉積物中的全部活生物含量。相關研究還包括污染物對淡水和海水微生物的影響。 • 臨床研究： 臨床研究應用包括：評價抗生素對微生物生長的影響，了解不同藥物對哺乳動物細胞的影響等。 技術說明盤形式: 微光度測定盤(96 well) 光輻射探測: 生物或化合光 靈敏度: 光電計數器，１attomole HRP（10-18 摩爾HRP）波長:300-680nm 操作: 自動掃描所有的wells 可調節(jié)integration時間 (0.01-10.0 秒) 可調節(jié)掃描次數接線: 顯示所有的microwell數據 容易校準數據輸出: Excel格式 連接PC的以太網接口軟件: 用戶易使用的軟件尺寸: 30.5 X 28 X 14 (+2.5) CM 應用場所： · 高等院校生命科學及生物化學實驗室；生物化學技術研究院所實驗室 · 醫(yī)院研究實驗室；生物制藥實驗室 · 政府藥檢、商檢、疾控中心實驗室 · 環(huán)境試驗室；法醫(yī)試驗室 · 食品等工業(yè)質量控制和檢測試驗室