色譜柱安裝和系統(tǒng)檢漏工作完成后,就可以對色譜柱進(jìn)行老化了。對色譜柱升至一恒定溫度,通常為其溫度上限。特殊情況下,可加熱至高于zui高操作10-20℃左右。但是一定不能超過色譜柱的溫度上限,那樣極易損壞色譜柱。升溫速度一定要快,不要將程序聲升溫的速度設(shè)定的太慢。當(dāng)?shù)玫嚼匣瘻囟群螅涗洸⒂^察基線。比例放大基線,以便容易觀察。初始階段,基線應(yīng)持續(xù)上升,在到達(dá)老化溫度后5-10分鐘開始下降,并且會(huì)持續(xù)30-90分鐘。當(dāng)達(dá)到一個(gè)固定的值后,基線就會(huì)穩(wěn)定下來。如果在2-3小時(shí)后基線仍無法穩(wěn)定在15-20分鐘后仍無明顯的下降趨勢,那么有可能系統(tǒng)裝置有泄漏或污染。遇到這樣的情況,應(yīng)立即將柱溫降至40℃以下,盡快地檢查系統(tǒng)并解決相關(guān)問題。如果還是繼續(xù)地老化,不僅對色譜柱有損害,而且始終得不到正常穩(wěn)定的基線。另外,老化的時(shí)間也不宜過長,不然會(huì)降低色譜柱的使用壽命。
一般來說,涂有極性固定相和較厚涂層的色譜柱老化時(shí)間較長,而弱極性固定較厚涂層的色譜柱所需的時(shí)間較短。而PLOT色譜柱的老化方法又各不相同,具體步驟請參閱隨柱子的操作說明書。
如果在色譜柱沒有與檢測器連接就進(jìn)行老化,那么老化后,色譜柱末端部分可能已被破壞。要先把柱子末端10-20cm部分截去,再將色譜柱連接到檢測器上。
溫度限定是指色譜柱能夠正常使用的應(yīng)用溫度范圍。如果操作溫度低于色譜柱的溫度下限,那么分離效果和峰形都不會(huì)很理想。但這樣對色譜柱本身并無什么損害。
溫度上限通常有兩個(gè)數(shù)值,數(shù)值較低的是恒溫極限。在此溫度下,色譜柱可以正常使用,而且無具體的持續(xù)時(shí)間限制。較高的數(shù)值是程序升溫極限。該溫度的持續(xù)時(shí)間通常不多于十分鐘。高于溫度上限的操作則會(huì)降低色譜柱使用壽命。