蛋白質(zhì)測(cè)定儀分析蕎麥蛋白質(zhì)的種類
蛋白質(zhì)測(cè)定儀法是測(cè)定食品、飼料和種子蛋白質(zhì)含量測(cè)定zui常用的方法。此方法較為準(zhǔn)確,但是采用這種方法復(fù)雜、費(fèi)時(shí)、試劑多、消化時(shí)還產(chǎn)生有害氣體,危害操作者的身體健康。特別是蒸餾定氮過(guò)程的效率低,不利于對(duì)大批量樣品進(jìn)行快速測(cè)定。
根據(jù)蕎麥四種蛋白清蛋白、球蛋白、谷蛋白和醇溶蛋白的溶解性不同,可采用不同的溶劑把四種蛋白質(zhì)分別提取出來(lái)。zui常用的方法有直接提取法和順序提取法。
直接提取法又叫一次提取法,即隨機(jī)選取部分種子,去殼、粉碎后混勻,加入適量的雙蒸水,采用超聲波提取技術(shù)提取清蛋白,5000r/min離心20min,測(cè)定上清液中蛋白質(zhì)的含量;而球蛋白、谷蛋白和醇溶蛋白提取的步驟與水溶蛋白提基本相同,僅提取液不同,分別為NaCl、弱酸或弱堿、乙醇,提取劑的濃度不
同提取得率也有很大差別,蛋白質(zhì)含量的測(cè)定可以使用全自動(dòng)定氮儀進(jìn)行測(cè)定分析。此法主要研究種子在不同提取液的情況下蛋白質(zhì)譜帶的帶型。電泳過(guò)程中可以觀察到出現(xiàn)在水溶蛋白電泳圖譜中的蛋白條帶,也會(huì)在鹽溶、酸溶和醇溶蛋白的圖譜中出現(xiàn)。表明運(yùn)用直接提取法對(duì)鹽溶、酸溶和醇溶蛋白進(jìn)行提取時(shí),它們易受到水溶蛋白的污染,因此這種提取方法是不嚴(yán)格的。
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