實驗原理
① 35 μL外泌體樣品滴加在芯片上孵育;
② 預(yù)先包被的抗體特異結(jié)合外泌體表面蛋白以捕獲外泌體;
③ 再使用熒光抗體特異性標(biāo)記需要表征的標(biāo)記物;
④ 最后用ExoView R100檢測外泌體粒徑、計數(shù)、蛋白表達(dá)(CD9,CD81,CD63等)及共定位。
試劑盒特點
特異性捕獲
陽性外泌體計數(shù)
芯片捕獲外泌體后,可通過SP-IRIS技術(shù)直接檢測樣品中外泌體的數(shù)量。
單個外泌體蛋白共定位分析
檢測每個外泌體的熒光信號并進(jìn)行統(tǒng)計,可獲得熒光共定位信息,用于分析樣品中不同表型外泌體的比例。
無需純化
使用抗體捕獲模式,防止樣品中雜質(zhì)影響結(jié)果,可直接檢測血液、尿液和細(xì)胞培養(yǎng)液中的外泌體,未純化樣品的測量結(jié)果與純化后基本一致。
粒徑分辨率高
高精度SP-IRIS技術(shù),可檢測≥50 nm的外泌體,測量結(jié)果與電子顯微鏡檢測結(jié)果基本一致,并統(tǒng)計生成外泌體的粒徑分布結(jié)果。
可檢測外泌體內(nèi)容物
試劑盒配套相應(yīng)的穿膜劑,可穿透外泌體并對外泌體內(nèi)容物進(jìn)行染色并檢測,未穿膜時只能檢測到跨膜蛋白CD9的熒光信號,穿膜后即可檢測到外泌體內(nèi)容物Syntenin的表達(dá)。