型號:WBSH0500
品牌:Millipore
產(chǎn)品信息
檢測方法:化學(xué)發(fā)光
質(zhì)量水平:MQ300
使用說明:除非我們的產(chǎn)品目錄或產(chǎn)品隨附的其他公司文檔中另有說明,否則我們的產(chǎn)品僅用于研究用途,不得用于任何其他目的,包括但不限于未經(jīng)的商業(yè)用途,體外診斷用途,離體或體內(nèi)治療用途或?qū)θ祟惢騽游锏娜魏晤愋偷南M或應(yīng)用。
存儲條件:2-8°C
產(chǎn)品描述:
Immobilon®信號增強劑專用于信號強度較低的Western免疫印跡應(yīng)用。這種即用型試劑兼具信號放大和封閉功能,可通過增強抗體-抗原反應(yīng),使產(chǎn)生的信號強度比傳統(tǒng)試劑強2-10倍。該試劑適用于傳統(tǒng)免疫檢測或SNAPi.d.®蛋白質(zhì)檢測系統(tǒng)的膜封閉和抗體稀釋步驟。Immobilon®信號增強劑可兼容PVDF和硝酸纖維素印跡膜,適用于顯色法、化學(xué)發(fā)光法和熒光檢測方法。
使用指南
- 為確保產(chǎn)生足夠的信號放大,必須使用Immobilon®信號增強劑作為封閉液以及一抗和二抗稀釋液。
- 與SNAP i.d.®蛋白質(zhì)檢測系統(tǒng)一起使用時,應(yīng)參閱其用戶指南關(guān)于試劑體積和實驗方案的詳細(xì)說明。Immobilon®信號增強劑可替代傳統(tǒng)的封閉液和抗體稀釋液。
- 建議使用Immobilon®-FL轉(zhuǎn)印膜(目錄號IPFL00010)進(jìn)行熒光檢測。
- Immobilon®信號增強劑會使一些預(yù)染分子量marker的信號增強。因此,建議將預(yù)染marker的用量減少50-70%(如:使用1X上樣緩沖液按1:10稀釋marker,并取3–5μL上樣到SDS-PAGE凝膠上)。
- 確保使用特異性好的目標(biāo)蛋白一抗。
- 為避免產(chǎn)生高背景,始終佩戴手套處理轉(zhuǎn)印膜。
- 使用平頭鑷子(目錄號XX6200006P)夾取轉(zhuǎn)印膜,避免膜撕裂或留下夾痕。
- 加入足量的Immobilon®信號增強劑覆蓋膜表面,以封閉印跡膜。
- 將印跡膜孵育一定時間(通常為1小時),其間輕輕搖動。
- 使用Immobilon®信號增強劑將一抗稀釋至所需濃度。
- 倒出封閉液并加入稀釋的一抗溶液,孵育印跡膜一定時間(通常為1小時),其間輕輕搖動。
- 移除一抗溶液。
- 使用TBST洗膜3-4次,每次至少5分鐘。
- 使用Immobilon®信號增強劑將二抗稀釋至所需濃度。
- *后一次洗滌后,丟棄緩沖液并加入稀釋的二抗溶液。
- 將印跡膜孵育一定時間(通常為1小時),其間輕輕搖動。
- 移除二抗溶液,然后使用TBST洗膜3-4次,每次至少5分鐘。
- 繼續(xù)進(jìn)行下一步印跡膜檢測。