可能不少小伙伴都有這樣的疑惑，“我的目的蛋白做WB沒有條帶或者條帶特別淡，做IHC也沒有陽性結果，嘗試了不同稀釋比的抗原，一抗，二抗，更換了不同廠家生產的抗體，結果還是不好，內參和其他蛋白都有正常的結果，why？”
這里你就要考慮一下，是不是目的蛋白本身的表達量就非常低，增加抗體濃度的作用也是非常有限的，zui終有小伙伴領悟了，然后又看到了相關文獻，報道該目的蛋白在正常樣本種表達量確實特別低，都到皮克級別了，難怪常規(guī)的WB和IHC檢測結果不好...
于是接下來，他們試用了一種多聚HRP標記的二抗，成功檢測到了陽性結果。到這里，你是不是要問，是什么好東西這么神奇？接下來我們展開說：
Poly HRP是一種增強信號的酶標記物，由共價辣根過氧化物酶（HRP）聚合物組成。目的蛋白的信號通過抗體傳遞給Poly HRP上攜帶的大量HRP分子，然后HRP分子作用于底物釋放信號，使得目的蛋白檢測信號得到放大，這些信號放大程度與HRP聚合范圍成正比，從而可以利用多聚HRP在免疫分析中檢測到低豐度蛋白（pg級別范圍）。
鏈霉親和素-poly HRP綴合物（SA－PolyHRP）由五個相同的HRP同聚物組成，同時與多個鏈霉親和素分子共價偶聯(lián)。目前生產過程中使用了三種不同的同聚物，它們分別是PolyHRP20、PolyHRP40和PolyHRP80。鏈霉親和素-PolyHRP80比鏈霉親和素-PolyHRP40靈敏度更高，鏈霉親和素-PolyHRP40比鏈霉親和素-PolyHRP20靈敏度更高。
不同尺寸HRP多聚體示意圖
用鏈霉親和素-PolyHRP技術檢測技術標記非常簡單，可以將它們結合到現(xiàn)有的測定系統(tǒng)中，現(xiàn)有的步驟，孵育間隔等幾乎不需要改變。所需試劑基本上與使用標準鏈霉親和素-HRP進行的常規(guī)ELISA相同。類似地，PolyHRP幾乎可用于任何以HRP底物開發(fā)的檢測系統(tǒng)（比色法、熒光法、包括化學發(fā)光），這也意味著與現(xiàn)有的ELISA和IHC儀器*兼容。PolyHRP檢測可能有利的其他分析方法包括高靈敏度DNA/RNA雜交分析和配體受體分析。
zui后，小編給大家推一下艾美捷Fitzgerald的多聚HRP相關研究工具，包括鏈霉親和素-polyHRP（Streptavidin Poly-HRP），polyHRP標記的各類二抗等等。
Fitzgerald成立于1989年, 總部位于美國馬薩諸塞州的阿克頓（Acton），Acton是他們主要的銷售團隊，實驗室以及分銷中心的所在地。Fitzgerald還設有制造工廠，包括加利福尼亞，紐約，加拿大和愛爾蘭。Fitzgerald是一家一抗，二抗，重組和天然蛋白，ELISA試劑盒，血清和血漿以及其他生物試劑的供應商，是較早進入國內診斷市場的品牌之一，產品種類豐富，是體外診斷試劑生產企業(yè)的原料供應商。
作為Fitzgerald在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供zui全面的Fitzgerald產品。
貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 |
30R-AA034 | Aminoethyl Poly-HRP40 | 5 mg |
65R-P102 | Protein A/G-Poly-HRP40 | 1 mg |
65R-P100 | Protein A-Poly-HRP20 | 1 mg |
65R-P103 | Protein A-Poly-HRP20 | 50 ug |
65R-P101 | Protein A-Poly-HRP40 | 1 mg |
65R-P104 | Protein A-Poly-HRP40 | 50 ug |
55R-APBLOT | Protein A-Poly-HRP Blotting Developer Kit | 1 kit |
85R-115 | Stabilizing Buffer (BSA based) | 100 ml |
85R-116 | Stabilizing Buffer (Casein based) | 100 ml |
85R-121 | TMB Substrate | 30 ml |
43R-IG101PH | Goat anti Mouse IgG (H + L) (Poly-HRP40) | 1 mg |
43R-IG163PH | Goat anti Mouse IgG (H + L) (Poly-HRP40) | 50 ug |
55R-GAMPBLOT | Mouse IgG (H + L) Poly-HRP Blotting Develope | 1 kit |
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文章來源：艾美捷科技
艾美捷Fitzgerald多聚HRP標記抗體解決方案
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