高通量組織研磨機(jī) 技術(shù)參數(shù): 1. 設(shè)備尺寸:15 in.(38.1 cm)x20.49 in.(52 cm)x25.25 in. (64.1 cm) • 杜邦旗下先鋒良種與SPEX共同開(kāi)發(fā)設(shè)計(jì),為*專(zhuān)門(mén)為農(nóng)業(yè)植物樣品而研發(fā)的一款新型高通量組織研磨機(jī)
SPEX GENO 2010 GRINDER®高通量組織研磨機(jī)是杜邦先鋒公司專(zhuān)門(mén)為農(nóng)業(yè)植物樣品合分子生物學(xué)方面研究而研發(fā)的一款新型高通量組織研磨機(jī)。大通量接近400,可一次同時(shí)研磨384 個(gè)樣品,因而特別適用于植物和動(dòng)物組織中核酸、蛋白質(zhì)和其它成分的提取。研磨樣品包括植物的根、莖、葉、花、果、種子和某些動(dòng)物組織;另外它還可以對(duì)酵母、培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞、細(xì)菌細(xì)胞等進(jìn)行破碎,從而提取其中的組分。
由于采用了的垂直上下震動(dòng)模式,GENO 2010研磨的樣品具有研磨更加充分、更均勻、樣品重復(fù)性更好、樣品之間沒(méi)有交叉污染等優(yōu)點(diǎn),是真正的高通量組織研磨機(jī)。
植物組織核酸提取
為了從完整種子中分離核酸,需要先用機(jī)械粉碎的方法破碎種子,再提取和純化核酸。通常的機(jī)械破碎方法是人工采用研缽和杵進(jìn)行研磨的方式;但是,這種方法并不適合高通量的種子破碎,因?yàn)槿斯ぱ心ニ俣群苈已欣徍丸频闹貜?fù)使用也容易導(dǎo)致交叉污染。用GENO對(duì)微孔板中的種子進(jìn)行機(jī)械研磨,可以同時(shí)使核酸從大量種子細(xì)胞中釋放出來(lái);再用傳統(tǒng)的分離方法就可以從勻漿液中純化出核酸。用水浸泡過(guò)夜的大豆可在3分鐘內(nèi)高效一致地被均質(zhì)化,所得漿液可以作為DNA分析的材料來(lái)源。
從培養(yǎng)的細(xì)胞中快速提取基因組DNA為PCR分析做準(zhǔn)備
在科學(xué)家的研究和診斷過(guò)程中,PCR大大提高了對(duì)核酸進(jìn)行檢測(cè)和定量測(cè)序的效率。但是,因?yàn)?/span>PCR方法通常需要在模板擴(kuò)增前有一個(gè)純化步驟,因此這個(gè)過(guò)程并不快。純化步驟包括細(xì)胞收集和核酸的溶解,接下來(lái)還要用層析樹(shù)脂把核酸從裂解液中分離出來(lái)。雖然這些純化方法已經(jīng)很大的發(fā)展,但是它們?nèi)匀恍枰馁M(fèi)大量時(shí)間;而且,大量重復(fù)的試驗(yàn)可能會(huì)耗費(fèi)大量昂貴的材料。
GENO技術(shù)能夠一次快速而低成本地破碎大量培養(yǎng)的細(xì)胞,從而為后期對(duì)基因組DNA進(jìn)行PCR分析而做準(zhǔn)備。用GENO對(duì)微孔板中大量的培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行高通量均質(zhì)化,再通過(guò)層析樹(shù)脂對(duì)核酸進(jìn)行純化,并進(jìn)行PCR分析,能大大提高基因組分析的效率。
酵母的96孔高通量破碎
多年的生物化學(xué)、基因組學(xué)和分子生物學(xué)研究取得的豐富信息表明,酵母已經(jīng)成為生物系統(tǒng)研究的模式型和生物系統(tǒng)研究的模式生物和生物藥學(xué)家的有力工具。酵母已成為基因表達(dá)研究和蛋白質(zhì)重組表達(dá)的通用宿主,包括Picbia、Hansenula、Debaryomyces均被研究者所使用,但使用的仍然是Saccbatomyces酵母。
酵母mRNA和細(xì)胞內(nèi)蛋白通常很難用傳統(tǒng)的酶解方法從細(xì)胞中完整地提取出來(lái)。裂解酶中通常含有核糖核酸酶和其他蛋白,它們不僅會(huì)攻擊細(xì)胞壁,而且會(huì)攻擊特定的分子。並且,由酶解產(chǎn)生的原生質(zhì)體通常需要借助一定的試劑進(jìn)行溶解而導(dǎo)致很多蛋白貭變性失活。因此,通常需要采用機(jī)械的方式破碎酵母細(xì)胞從而釋放其內(nèi)溶物。
機(jī)械破碎酵母?jìng)鹘y(tǒng)上採(cǎi)用壓榨機(jī)或球磨機(jī)。這兩種方法中都是單樣品操作的。對(duì)那些需要大量酵母克隆在一個(gè)高通量篩選環(huán)境中的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō),單樣品操作是個(gè)瓶頸並且是不切實(shí)際的。因此,需要一種方法可以高通量的機(jī)械分裂細(xì)胞。GENO一開(kāi)始為深孔版中破碎種子而設(shè)計(jì)的球磨機(jī),現(xiàn)在被用來(lái)在微孔版中對(duì)酵母進(jìn)行破碎。
細(xì)菌細(xì)胞的裂解(嗜鹽菌和桿菌)
GENO能通過(guò)機(jī)械碰撞的方式裂解細(xì)菌細(xì)胞。以格蘭氏陰性耐鹽菌Halomonas elongate和格蘭氏陽(yáng)性桿菌為模式研究對(duì)象,SPEX已經(jīng)發(fā)展了相應(yīng)的兩種技術(shù):細(xì)菌培養(yǎng),收獲并沖洗掉多余的培養(yǎng)基,將細(xì)胞懸浮于微孔版中的鹽水溶液中,在研磨界質(zhì)存在的情況下用GENO對(duì)細(xì)胞進(jìn)行震蕩破碎,6-9分鐘就能夠釋放足夠量的核酸,進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。
應(yīng)用領(lǐng)域
分子標(biāo)記輔助育種、基因組學(xué)、系統(tǒng)生物學(xué)核分子進(jìn)化、轉(zhuǎn)機(jī)因研究及其他生化研究領(lǐng)域。美國(guó)藥物食品管理局USFDA及環(huán)保署USEPA采用GENO作為殘留農(nóng)藥測(cè)試或有毒物質(zhì)樣品前處理,效率增加3-5倍,通量速率增加3-5倍,準(zhǔn)確性以及在現(xiàn)性大幅提高。
2. 重量:60 1bs.(27.24kg)
3. 功率:1/3馬力
4. 電源線:230V/50Hz兩相
5. 夾具行程:3.2cm(垂直)
6. 夾具速率:500-1750次/分鐘可調(diào)
7. 安全特征:兩道安全鎖、開(kāi)蓋停止運(yùn)作,兩程密封夾
8. 定時(shí)器:數(shù)字顯示為分:秒,大值為5:00
主要特點(diǎn):
• 是提取植物樣品中核酸,蛋白質(zhì)其分析成分的經(jīng)過(guò)特殊設(shè)計(jì)的研磨機(jī)
• 高通量:使用大夾具(2199)可同時(shí)研磨至384個(gè)樣品,并可適用于多種尺寸樣品的研磨,*提高了工作效率
• 為了保證樣品的重現(xiàn)性、有效性、可比性,研磨機(jī)可設(shè)置時(shí)間、速率和循環(huán)次數(shù),保證每次研磨和下一次研磨條件的一致性,時(shí)間3分鐘,速率1500 rpm。
• 有安全鎖裝置,一個(gè)充氣的氣缸鎖使蓋子穩(wěn)固,用起來(lái)十分安全。
• 常溫、低溫動(dòng)植物樣研磨專(zhuān)家
樣品容器
雖然GENO的夾具是為夾住兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的深孔板而設(shè)計(jì)的,但是它也能適合于具有相同尺寸(5inchx3inchx2inch)的任何東西。這包括具有更少或更多樣品孔的深孔板、固定多個(gè)獨(dú)立小瓶的支架、和其它可能的構(gòu)件。另外,夾具也能適用于高度在2.25inch內(nèi)的不同樣品容器