杯式超聲波破碎儀 Lawson08-II用于無(wú)菌破碎,隔著離心管能打斷染色體、破碎細(xì)胞。帶消音壓緊裝置,可選配DL-1510型低溫冷卻液循環(huán)機(jī)。
LAWSON98-V非接觸式超聲波粉碎機(jī),也叫杯式破碎,用于無(wú)菌破碎,隔著離心管能打斷染色體、破碎細(xì)胞。專為二代測(cè)序DNA樣本與染色質(zhì)免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)樣本前處理量身訂做,相比傳統(tǒng)的探頭接觸式超聲波細(xì)胞粉碎機(jī),非接觸式樣品可在密封容器下進(jìn)行破碎,不產(chǎn)生感染性飛霧,超聲波探頭與樣品不接觸,避免交叉污染。非接觸式超聲波粉碎機(jī)可獲得傳統(tǒng)超聲方式*的質(zhì)量、效率和安全性。
一次可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品,實(shí)驗(yàn)效率高;無(wú)磨損,掉渣現(xiàn)象,各樣品均在單獨(dú)的全封閉試管中,避免交叉污染;可選配冷卻水循環(huán)系統(tǒng),便于樣品在4℃水浴超聲波,能量分布均勻,超聲作用*;超聲參數(shù)設(shè)置靈活,實(shí)驗(yàn)步驟標(biāo)準(zhǔn)化,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好,結(jié)果可靠性高。
逐漸成為ChIP(染色質(zhì)免疫共沉淀)和DNA剪切研究平臺(tái)*的標(biāo)準(zhǔn)化工具。實(shí)驗(yàn)效率高、結(jié)果可靠、重復(fù)性佳,低可處理5ul的樣本,適用珍貴的樣本。
⒈無(wú)氣霧浮質(zhì)產(chǎn)生—增強(qiáng)生物安全性(如分支桿菌、病毒等)
⒉消除了樣品交叉污染的危險(xiǎn)
⒊消除了傳統(tǒng)的探頭磨損掉渣現(xiàn)象
⒋可處理多種樣品,樣品處理范圍廣泛
⒌適用于各種標(biāo)準(zhǔn)容器
⒍可用于處理微量樣品,小到5ul
⒎自動(dòng)的連續(xù)旋轉(zhuǎn)離心管則使超聲波的能量分布更為均勻
⒏可選配高低溫恒溫水浴槽、按照客戶需求定制各種直徑的Eppendorf管破碎旋轉(zhuǎn)基座
型號(hào) | Lawson08-II |
頻率 | 19.5-20.5KHz |
功率 | 3200W |
功率調(diào)節(jié)范圍 | 450--3200W連續(xù)可調(diào) |
時(shí)間控制精度 | ±1%任意設(shè)定 |
工作次數(shù)設(shè)定 | ±1%任意設(shè)定 |
超聲時(shí)間設(shè)定 | 1—99次,數(shù)碼顯示 |
間隙時(shí)間設(shè)定 | 1—99次,數(shù)碼顯示 |
變幅桿末端直徑 | Φ30 |
破碎容量 | (0.1-2ml)×16 |
占空比 | 1-99% |
電源 | 220/110V 50Hz/60Hz |
工作環(huán)境 | 0--32℃,RH80,760±30mmHg |
換能器組件約 | 18kg |
換能器重量 | 24kg |
發(fā)生器尺寸 | 140×330×210mm |
超聲波發(fā)生器 | 一臺(tái) |
振動(dòng)系統(tǒng)(換能器組件) | 一只 |
管子 | 十六根 |
十字夾(在隔音箱內(nèi)) | / |
試管夾(在隔音箱內(nèi)) | 一只 |
電源線 | 一根 |
扳手(用于拆卸變幅桿) | / |
保險(xiǎn)絲 | 四只 |
使用說(shuō)明書 | 一份 |
合格證 | 一張 |
保修卡 | 一份 |
細(xì)胞破碎的方法:
一、機(jī)械破碎法:是指利用搗碎機(jī)、研磨器或勻漿器 等將細(xì)胞破碎開(kāi)來(lái) 。
1. 高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內(nèi)約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調(diào)速器先撥至慢處,開(kāi)動(dòng)開(kāi)關(guān)后,逐步加速至所需速度。此法適用于動(dòng)物內(nèi)臟組織、植物肉質(zhì)種子等。
2. 玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來(lái)回研磨,上下移動(dòng),即可將細(xì)胞研碎,此法細(xì)胞破碎程度比高速組織搗碎機(jī)為高,適用于量少和動(dòng)物臟器組織。
二、物理破碎法:指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細(xì)胞破碎開(kāi)來(lái)。
1:用一定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液,使細(xì)胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動(dòng)力破碎細(xì)胞壁和細(xì)胞器)。
機(jī)制:可能與強(qiáng)聲波作用溶液時(shí),氣泡產(chǎn)生、長(zhǎng)大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān),空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細(xì)胞裂解。
超聲波破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時(shí)間、細(xì)胞濃度和細(xì)胞類型等。(使用時(shí)注意降溫,防止過(guò)熱)。
2. 高壓破碎:細(xì)胞懸浮液從高壓室的環(huán)狀隙噴射到靜止的撞擊環(huán)上,被迫改變方向經(jīng)出口管流出。此過(guò)程中細(xì)胞經(jīng)歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化,從而破碎釋放內(nèi)含物。
這是一種溫和的、*破碎細(xì)胞的較理想的方法。
3. 反復(fù)凍融法:將細(xì)胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復(fù)幾次,由于細(xì)胞內(nèi)冰粒形成和剩余細(xì)胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎。
三、化學(xué)破碎法:指利用甲醛、丙酮等有機(jī)溶劑或表面活性劑作用于細(xì)胞膜,使細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)遭到破壞或透性發(fā)生改變 。
有些動(dòng)物細(xì)胞,例如腫瘤細(xì)胞可采用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細(xì)胞膜破壞。濃度一般為1mg/ml。
四、酶學(xué)破碎法 :選用合適的酶,使細(xì)胞壁遭到破壞,進(jìn)而在低滲溶液中將原生質(zhì)體破碎開(kāi)來(lái)。
細(xì)菌細(xì)胞壁較厚,可采用*處理效果更好。
裂解液標(biāo)準(zhǔn)配方: :50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml*。(*在這個(gè)pH范圍內(nèi)比較好發(fā)揮作用) 。
綜合敘述:無(wú)論用哪一種方法破碎組織細(xì)胞,都會(huì)使細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導(dǎo)致天然物質(zhì)量的減少,加入二異丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且應(yīng)該在破碎的同時(shí)多加幾次;另外,還可通過(guò)選擇pH、溫度或離子強(qiáng)度等,使這些條件都要適合于目的物質(zhì)的提取。
使用前注意事項(xiàng):
1.根據(jù)所處理的樣本體積選擇適當(dāng)探頭,使用前后均須用酒精棉球擦洗探頭,換探頭須剛扳手更換;
2.AMPLITUDE旋鈕打開(kāi)時(shí),探頭不得在空氣中暴露,特殊情況下(測(cè)試探頭)不應(yīng)超過(guò)10秒;
3.使用前準(zhǔn)備好冰盒,樣品處理時(shí)必須置于冰浴中,樣品濃度不可過(guò)大。