別 名 ECT2 (phospho S370); ECT2 (phospho Ser370); p-ECT2 (Ser370); ECT 2; ECT2; ECT-2; ECT2 protein; Epithelial cell transforming sequence 2; Epithelial cell transforming sequence 2 oncogene; Epithelial cell transforming sequence 2 oncogene protein; FLJ10461; MGC138291; Protein ECT2; ECT2_HUMAN; Epithelial cell-transforming sequence 2 oncogene.
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Anti-phospho-ECT2 (Ser370) |
貨號(hào) | FSK6322 |
英文名稱 Anti-phospho-ECT2 (Ser370)
中文名稱 磷酸化上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體 ?
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、產(chǎn)品僅用于科研鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過(guò)與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
?
抗體的鑒定:
1)抗體的效價(jià)鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力。抗體的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無(wú)窮大時(shí),表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:產(chǎn)品僅用于科研抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
人假定蛋白LOC677168 elisa分析檢測(cè)試劑盒Anti-CK8(Cytokeratin 8) Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 新陳代謝 線粒體
人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)elisa分析檢測(cè)試劑盒Anti-Mouse CD90/Thy1 DyLight 488 conjugated Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細(xì)胞生物 染色質(zhì)和核信號(hào) 表觀遺傳學(xué)
人甲狀腺素抗體(TAb)elisa分析檢測(cè)試劑盒Anti-Mouse CD62P DyLight 550 conjugated Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞類型標(biāo)志物 細(xì)胞骨架
人激肽釋放酶6(KLK 6)elisa分析檢測(cè)試劑盒Anti-Mouse CD8 alpha DyLight 550 conjugated Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 細(xì)胞類型標(biāo)志物
人激肽釋放酶2(hK 2)elisa分析檢測(cè)試劑盒Anti-Mouse CD90/Thy1 DyLight 550 conjugated Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
人肌聯(lián)蛋白(TTN)抗體elisa分析檢測(cè)試劑盒Anti-14-3-3 gamma/YWHAG Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物
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大鼠磺基轉(zhuǎn)移酶(SULT1A1)elisa分析檢測(cè)試劑盒Anti-Mouse CD8 alpha DyLight 488 conjugated Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞骨架
人甲基化CpG結(jié)合蛋白2(MECP2)elisa分析檢測(cè)試劑盒Anti-Mouse CD62P DyLight 488 conjugated Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白
人極低密度脂蛋白(VLDL)elisa分析檢測(cè)試劑盒Anti-human Transferrin Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
人白介素-21(IL-21)elisa分析檢測(cè)試劑盒Anti-ABAT Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶
人黑色素elisa分析檢測(cè)試劑盒Anti-AAMP Antibody(原貨號(hào)PB0088)研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 生長(zhǎng)因子和激素
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人骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)elisa分析檢測(cè)試劑盒Anti-ABCA4 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
雞過(guò)氧化氫酶elisa分析檢測(cè)試劑盒Anti-ABCB1 Antibody研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) b-淋巴細(xì)胞
磷酸化上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體3%氯溶液25048250g副溶血性弧菌的血清學(xué)檢測(cè)。(GB/T4789.7-2008)
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胰示肉湯基礎(chǔ) Tryptose Broth Base 250克 肺炎鏈球菌、布魯氏菌細(xì)菌的培養(yǎng)