Anti-p53 DINP1抗體,p53誘導(dǎo)核蛋白1抗體
規(guī)格:100ul,200ul,1mg
宿主:兔,鼠,羊
Ig類型:IgG
克隆類型:?jiǎn)慰寺?/span>/多克隆
標(biāo)記物:無標(biāo)記物.
需要標(biāo)記抗體,可咨詢客服訂購(gòu)。相關(guān)標(biāo)記抗體:HRP標(biāo)記抗體,Biotin標(biāo)記抗體,Gold標(biāo)記抗體,RBITC標(biāo)記抗體,AP標(biāo)記抗體,FITC標(biāo)記抗體,Cy3標(biāo)記抗體,Cy5標(biāo)記抗體,Cy5.5標(biāo)記抗體,Cy7標(biāo)記抗體,PE標(biāo)記抗體,PE-Cy3標(biāo)記抗體,PE-Cy5標(biāo)記抗體,PE-Cy5.5標(biāo)記抗體,PE-Cy7標(biāo)記抗體,APC標(biāo)記抗體,Alexa Fluor 350標(biāo)記抗體,Alexa Fluor 488標(biāo)記抗體,Alexa Fluor 555標(biāo)記抗體,Alexa Fluor 647標(biāo)記抗體
濃度 :1mg/ml
純化方式:抗原特異性親和純化
緩沖液成分:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
應(yīng)用: WB;IHC-P、IHC-F; ICC; IP;IF;ELISA。如果抗體需用于流式細(xì)胞術(shù),請(qǐng)參見流式抗體。具體適用的實(shí)驗(yàn)和針對(duì)的物種請(qǐng)來電或99咨詢。公司提供Elisa實(shí)驗(yàn)配對(duì)抗體抗原,需要請(qǐng)電詢或99咨詢。
產(chǎn)品稀釋比例:ELISA=1:1000,Western blotting=1:500,IF=1:100-50,IHC-P=1:100-500,IHC-F=1:100-500,Immunohistocry=1:100-500
Optimal working dilutions must be determined by end user.
保質(zhì)期:1年
儲(chǔ)存溫度:-20℃(避免反復(fù)凍融)
Anti-p53 DINP1抗體,p53誘導(dǎo)核蛋白1抗體
蛋白質(zhì)樣品(抗原)的制備:① 細(xì)胞的處理方法:向收集到的細(xì)胞中加入RIPA裂解緩沖液(三中蛋白酶抑制在使用前加入,終濃度為2ug/ml)在冰上裂解30—60min,然后再插入冰盒進(jìn)行超聲,超聲強(qiáng)度以不產(chǎn)生泡沫為準(zhǔn),超聲每次2-3秒,重復(fù)3-4次,再離心12000rpm3-5min,吸取上清備用。(超聲強(qiáng)度不能過大,防止蛋白碳化)組織的處理方法:按實(shí)驗(yàn)要求將組織從動(dòng)物體內(nèi)取出(樣品不宜反復(fù)凍融),取少量(1-2g左右)放入玻璃勻槳器中研磨成勻漿,然后轉(zhuǎn)入EP管中進(jìn)行超聲,超聲強(qiáng)度以不產(chǎn)生泡沫為準(zhǔn),超聲每次5-7秒,重復(fù)5-6次,再離心12000rpm3-5min,吸取上清備用。②上述兩種方法得來的樣品處理液還要加入1/4體積左右的上樣Buffer,然后放在沸水浴中加熱3-4min使蛋白變性,方可作為樣品點(diǎn)樣。(注意:在加熱組織裂解液時(shí),肝臟和腎臟組織要特別注意其本身濃度,在制作裂解液時(shí)就適當(dāng)稀釋,否則加熱后會(huì)凝結(jié)成固態(tài)。還有些組織處理后很粘稠,有帶絲狀物,這是未裂解的核酸,可以適當(dāng)離心后再用。)免疫動(dòng)物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠產(chǎn)生致敏B淋巴細(xì)胞的 過程。 一般選用6-8周齡雌性Balb/c小鼠,按照預(yù)先制定的免疫方案進(jìn)行免疫注射。 單克隆抗體的大量制備 單克隆抗體的大量制備重要采用動(dòng)物體內(nèi)誘生法和體外培養(yǎng)法。 (1)體內(nèi)誘生法 取Balb/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液體石臘或降植烷進(jìn)行預(yù)處理。1-2周后,腹腔內(nèi)接種雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞在小鼠腹腔內(nèi)增殖,并產(chǎn)生和分泌單克隆抗體。約1-2周,可見小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可獲得大量單克隆抗體。 (2)體外培養(yǎng)法 將雜交瘤細(xì)胞置于培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中,雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生并分泌單克隆抗體,收集培養(yǎng)上清液,離心去除細(xì)胞及其碎片,即可獲得所需要的單克隆抗體。但這種方法產(chǎn)生的抗體量有限。近年來,各種新型培養(yǎng)技術(shù)和裝置不斷出現(xiàn),大大提高了抗體的生產(chǎn)量。