操作步驟(僅供參考):
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品名稱:Hoechst 33342供應商
規(guī)格:10mg
儲存條件:—20℃,12個月
用途:又稱培養(yǎng)細胞消化液,用于培養(yǎng)細胞的消化,或者一些組織的消化。
注意事項:無菌溶液,經(jīng)過濾除菌處理。主要由胰酶或胰蛋白酶、EDTA組成,含酚紅。自備材料:
1、 PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液
2、 顯微鏡
3、 離心機
注意事項:
1、 盡量減少反復凍融的次數(shù),以免失效。
2、在使用 Trypsin-EDTA solution 過程中,要特別注意避免消化液被細菌污染。
3、Trypsin-EDTA solution 消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1. 貼壁細胞的消化:
a.吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
b.加入少量胰酶細胞消化液(含酚紅,不含EDTA),略蓋過細胞,室溫放置30秒至2分鐘。不同的細胞消化時間有所不同。
c.顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除胰酶細胞消化液(含酚紅,不含EDTA)。加入含血清的*細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
d.如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細胞消化液(含酚紅,不含EDTA)重新消化。 如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液(含酚紅,不含EDTA)后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2. 組織的消化:
a.不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。 附錄:不同胰酶細胞消化液的比較和選擇
1. 如果希望消化能力比較強,推薦選擇C0201胰酶細胞消化液(0.25%胰酶)和C0203 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅),這兩種胰酶細胞消化液都含有EDTA,消化能力相對更強一些。
2. 如果希望觀察比較方便,推薦選擇含酚紅的C0203 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅)和C0207 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅,不含EDTA)。
3. 對于酚紅可能會干擾后續(xù)的測試分析,推薦選擇不含酚紅的C0201 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶)和C0205 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,不含EDTA)。
4. 對于EDTA可能會干擾后續(xù)的測試分析時,推薦選擇不含EDTA的C0205 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,不含EDTA)和C0207 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅,不含EDTA)。
5. 對于胰酶特別敏感的細胞,即對于消化時間特別快、消化時間比較難控制的情況,推薦選擇C0202胰酶細胞消化液(0.05%胰酶)或C0204 胰酶細胞消化液(0.05%胰酶, 含酚紅)。
C10orf81英文名稱:CD40L人絡氨酸酶(TYR)免疫試劑盒
C19orf47英文名稱:Alpha s1 Casein人輪狀病毒抗原(RV Ag)免疫試劑盒
C19orf54英文名稱:CIDEB人輪狀病毒(RV)抗體(IgG)免疫試劑盒
C1GALT1英文名稱:Scavenging Receptor SR-BI人輪狀病毒(RV)IgM 免疫試劑盒
C19orf18英文名稱:COPS7A人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)免疫試劑盒
C19orf21英文名稱:Survivin人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)免疫試劑盒
C19orf24英文名稱:Clostridium perfringens type D人卵清白蛋白免疫試劑盒
Collagen alpha-1(II) chain 英文名稱:Calcitonin人卵泡抑素樣蛋白1(FSTL-1)免疫試劑盒
Hoechst 33342供應商Phospho-c-Fos (Ser32)英文名稱:DCDC2雞H5型禽流感病毒(H5N1)抗體(IgG)免疫試劑盒
Phospho-c-Fos(Thr232)英文名稱:DAGLA雞G0/G1期開關基因(G0S2)免疫試劑盒
Phospho-c-Fos (Thr325)英文名稱:DOK4雞FAM172A蛋白(FAM172A)免疫試劑盒
FIH1英文名稱:DULLARD雞C反應蛋白(CRP)免疫試劑盒
F1 operon positive regulatory protein(NT)英文名稱:DYRK1A雞CD8分子(CD8)免疫試劑盒
Factor H英文名稱:DGCR6雞CD4分子(CD4)免疫試劑盒
FSH beta英文名稱:Doppel雞CD3分子(CD3)免疫試劑盒
FOX3英文名稱:DMPK雞B因子(BF)免疫試劑盒