QX100 微滴式數(shù)字PCR可對(duì)靶 DNA 分析進(jìn)行定量分析,定量的結(jié)果不再依賴(lài)于Ct值,直接給出靶序列的起始濃度,實(shí)現(xiàn)真正意義上的定量,適用于多種 PCR 定量分析領(lǐng)域, QX100 微滴式數(shù)字PCR被贊譽(yù)為第三代 PCR。
QX100 微滴式數(shù)字PCR的特點(diǎn)
l 無(wú)需標(biāo)準(zhǔn)品,標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),即可確定靶分子的起始濃度和拷貝數(shù)
l 有效區(qū)分濃度差異微小的樣品
l 檢測(cè)含量極低的核酸序列
n 以*的靈敏度檢測(cè)稀有靶DNA拷貝
n 以的精度測(cè)量細(xì)微的差異
特別適合如下應(yīng)用:拷貝數(shù)變異、突變檢測(cè)和基因相對(duì)表達(dá)研究等,并對(duì)遺傳病、癌癥、傳染病的研究提供了一種全新的技術(shù)思路與手段。
QX100 微滴式數(shù)字PCR技術(shù)原理
QX100 系統(tǒng)由兩個(gè)組件構(gòu)成:QX100 微滴生成儀和 QX100 微滴分析儀。為完成 Droplet Digital PCR 工作流程,還需要配備Bio-Rad 的96 深孔反應(yīng)模塊PCR儀。
QX100微滴生成儀(droplet generator)將含有核酸分子的反應(yīng)體系形成成千上萬(wàn)個(gè)納升級(jí)的微滴,其中每個(gè)微滴或不含待檢核酸靶分子,或者含有一個(gè)至數(shù)個(gè)待檢核酸靶分子,且每個(gè)微滴都作為一個(gè)獨(dú)立的PCR反應(yīng)器。經(jīng)PCR擴(kuò)增后,每個(gè)樣品的微滴將依次流過(guò) QX100 微滴分析儀,微滴分析儀(droplet reader)逐個(gè)對(duì)每個(gè)微滴進(jìn)行檢測(cè),終根據(jù)泊松分布原理以及陽(yáng)性微滴的比例,分析軟件可計(jì)算給出待檢靶分子的濃度或拷貝數(shù),實(shí)現(xiàn)對(duì)靶 DNA 進(jìn)行定量分析。