實驗操作步驟:
a.采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動物。
b.立即在無菌超凈臺內(nèi)用70%乙醇擦洗整個動物。
c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。
d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養(yǎng)皿上。
e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。
f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 | 貨號 |
小鼠肝癌細(xì)胞:H22 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞系 | GOY-01X0339 |
產(chǎn)品介紹:
名稱 小鼠肝癌細(xì)胞:H22
別稱Hepatoma-22; Hepatoma 22
種屬小鼠
年齡(性別)不詳
組織來源肝;肝癌
生長特性懸浮細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)淋巴母細(xì)胞樣
背景描述H22細(xì)胞是分離自小鼠腹水,由大連醫(yī)科學(xué)院建立。
生長培養(yǎng)基RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例3×10^5-5×10^5cells/mL
推薦換液頻率2~3次/周
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
注意事項該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,請注意離心收集細(xì)胞懸液;請勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。
處理方法:
收到細(xì)胞后,檢查外包裝是否完整,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請即時聯(lián)系。并進行以下操作:
1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 預(yù)熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。
4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5. ①若細(xì)胞密度較小,無菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達到80%以上,進行傳代。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得最佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,
避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗
并*清除殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
人 Carbonic Anhydrase IV / CA4 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H7N9 (A/Zhejiang/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IL18R1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
狗 IGFBP5 / IGFBP-5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 EphB6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 Glypican 3 / GPC3 / OCI-5ows\system32\EhStorShell.dll
小鼠肝癌細(xì)胞:H22 NTF97/KPNB1 親核素β1抗體 規(guī)格: 0.1mlATM 毛細(xì)管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
C2orf44 2號染色體開放閱讀框44抗體 規(guī)格: 0.2ml
250mL Acetate Buffer(乙酸緩沖液),1M,pH3.5 Acetate Buffer,1M,pH3.5 常溫保存
HLA DM 組織相容性復(fù)合體α抗體 規(guī)格: 0.2ml
DMT1 金屬離子轉(zhuǎn)運體1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Donkey Anti-Goat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的驢抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml
ILVBL 乙酰酸合成蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlBCL7B BCL7B蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Contactin 3 腦源性免疫球蛋白超家族蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1mlDonkey Anti-human IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
HOXc8 HOXc8抗體 規(guī)格: 0.1ml
T1N3肉湯 T1N3 Broth 250g
48 t 糖化血清蛋白測試盒(果糖胺法)(帶標(biāo)準(zhǔn)) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
2 ug pTet-Rev-on pTet-Rev-on 低溫運輸,-20℃保存