組成及試劑配制:
1、精氨酸支原體PCR檢測試劑盒價格酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
產品名稱 | 英文名稱 | 價格 |
精氨酸支原體PCR檢測試劑盒價格 | Abalone Spherical VirusPCR | 電詢 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
【標本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無菌棉球將試管塞緊后,密閉送檢。標本可立即用于檢測,也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標本、對照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標本,具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應管數),振蕩混勻數秒, 3000rpm離心數秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進行PCR擴增反應。
4. PCR擴增反應管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環(huán)參數設置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環(huán)45次;單點熒光檢測在60℃,反應體系為25?l。
熒光通道檢測選擇:選用FAM通道。
POFUT1 ELISA Kit全細胞色素C合成酶抗體蛋白O-巖藻糖基轉移酶1(POFUT1)ELISA試劑盒
POGLUT1 ELISA Kit血紅素轉運蛋白1抗體蛋白O-葡萄糖基轉移酶1(POGLUT1)ELISA試劑盒
POMT2 ELISA Kit血紅素轉運蛋白5抗體蛋白O-甘露糖基轉移酶2(POMT2)ELISA試劑盒
POMT1 ELISA Kit造血細胞信號轉導蛋白抗體蛋白O-甘露糖基轉移酶1(POMT1)ELISA試劑盒
PCMT1 ELISA Kit鹵酸脫鹵酶樣水解酶域內含蛋白1A抗體蛋白L-異天冬氨酸-O-甲基轉移酶(PCMT1)ELISA試劑盒
PCI ELISA KitE3連接酶抑制素受體抗體蛋白C抑制因子(PCI)ELISA試劑盒
C10 ELISA KitHis 結構域內含酪氨酸磷酸酶蛋白抗體蛋白C10(C10)ELISA試劑盒
PROC ELISA Kit多聚腺苷酸因子Clp1蛋白抗體蛋白C(PROC)ELISA試劑盒
MAT2α ELISA Kit心肌肌球蛋白重鏈抗體蛋氨酸腺苷轉移酶Ⅱα(MAT2α)ELISA試劑盒
EMILIN2 ELISA KitHECT E3泛素鏈接酶抗體彈性蛋白微原纖維界面因子2(EMILIN2)ELISA試劑盒
EMILIN1 ELISA Kit組蛋白去乙酰化酶11抗體彈性蛋白微原纖維界面因子1(EMILIN1)ELISA試劑盒
ELA4 ELISA Kit磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體彈性蛋白酶4(ELA4)ELISA試劑盒
ELA3B ELISA KitHHO1蛋白抗體彈性蛋白酶3B(ELA3B)ELISA試劑盒
ELA3A ELISA Kit磷酸化染色質相關蛋白1-γ抗體彈性蛋白酶3A(ELA3A)ELISA試劑盒
ELA2B ELISA Kit磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體彈性蛋白酶2B(ELA2B)ELISA試劑盒
ELA ELISA Kit磷酸化組蛋白H1.4抗體彈性蛋白酶(ELA)ELISA試劑盒
BSDL ELISA Kit羥酰谷胱甘肽水解酶蛋白抗體膽鹽依賴性脂肪酶(BSDL)ELISA試劑盒
CCK8 ELISA Kit磷酸化組蛋白去乙?;?抗體膽囊收縮素八肽(CCK8)ELISA試劑盒
CCKBR ELISA Kit人巨細胞病毒抗體膽囊收縮素B受體(CCKBR)ELISA試劑盒
CCKAR ELISA Kit磷酸化組蛋白去乙酰化酶4/5/7抗體膽囊收縮素A受體(CCKAR)ELISA試劑盒
BLVRB ELISA Kit磷酸化HER2受體抗體膽綠素還原酶B(BLVRB)ELISA試劑盒
BLVRA ELISA Kit磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體膽綠素還原酶A(BLVRA)ELISA試劑盒
CHDH ELISA Kit肝癌上調蛋白抗體膽堿脫氫酶(CHDH)ELISA試劑盒
CHPT1 ELISA KitHRAS樣抑制因子3抗體膽堿磷酸轉移酶1(CHPT1)ELISA試劑盒
CEPT1 ELISA Kit絲氨酸羧甲半胱氨酸合成酶抗體膽堿/乙醇胺磷酸轉移酶1(CEPT1)ELISA試劑盒
CH25H ELISA Kit癌細胞高表達蛋白Hec1抗體膽固醇-25-羥化酶(CH25H)ELISA試劑盒
MGL ELISA Kit磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體單酰甘油脂肪酶(MGL)ELISA試劑盒
MOGAT3 ELISA Kit組蛋白去乙?;?抗體單酰甘油-O-酰基轉移酶3(MOGAT3)ELISA試劑盒
MOGAT2 ELISA Kit半乳糖基轉移酶2抗體單酰甘油-O-?;D移酶2(MOGAT2)ELISA試劑盒
MOGAT1 ELISA Kit磷酸化異染色質蛋白1抗體單酰甘油-O-?;D移酶1(MOGAT1)ELISA試劑盒
SMUG1 ELISA Kit異染色質蛋白1磷酸化抗體單鏈選擇性單功能尿嘧啶DNA糖基化酶1(SMUG1)ELISA試劑盒
MCP4 ELISA Kit缺氧誘導因子2α /HIF-2α抗體單核細胞趨化蛋白4(MCP4)ELISA試劑盒
MCP3 ELISA Kit甲型流感病毒M2抗體單核細胞趨化蛋白3(MCP3)ELISA試劑盒
MCP2 ELISA Kit熱休克蛋白-47抗體單核細胞趨化蛋白2(MCP2)ELISA試劑盒
MCP1 ELISA Kit人類狀瘤病毒16抗體單核細胞趨化蛋白1(MCP1)ELISA試劑盒
MMA ELISA Kit缺氧誘導因子1α 抗體HIF-1α單核細胞巨噬細胞分化關聯蛋白(MMA)ELISA試劑盒
CAPZβ ELISA Kit組蛋白H3抗體戴帽蛋白肌Z系β(CAPZβ)ELISA試劑盒
ZAN ELISA Kit人類皰疹病毒8抗體/皰疹病毒8型帶粘蛋白(ZAN)ELISA試劑盒
GRM3 ELISA Kit人類巨細胞病毒抗體代謝型型谷氨酸受體3(GRM3)ELISA試劑盒
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。