組成及試劑配制:
1、非洲分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
| 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 價格 |
| 非洲分枝桿菌PCR檢測試劑盒說明書 | Abalone Spherical VirusPCR | 電詢 |
樣本采集、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
【標本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，將分泌物或咽拭子置入無菌玻璃管（含0.4ml滅菌生理鹽水），用無菌棉球?qū)⒃嚬苋o后，密閉送檢。標本可立即用于檢測，也可保存于-20℃待測。
【檢驗方法】
1.標本、對照品的核酸裂解處理
用商品化（取得醫(yī)療器械許可證）的RNA提取試劑盒處理標本，具體操作參見該試劑盒說明書。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l樣品置于1.5ml 離心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次； 13000rpm離心15min， 吸取上層液體，加入等體積異丙醇，顛倒混勻室溫靜置10min， 13000rpm離心10min，輕輕倒去上清；加入700?l 75%乙醇，顛倒洗滌，13000rpm離心5min，輕輕倒去上清，倒置于吸水紙上，棄盡液體或4000rpm離心5sec，將管壁上的殘余液體甩到管底部，用微量加樣器盡量吸干液體，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測混合液與n×1?l RT-PCR酶（n為反應管數(shù)）,振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中，然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽性對照品各5?l分別加入PCR管中，蓋好管蓋，立即進行PCR擴增反應。
4. PCR擴增反應管置于定量熒光PCR儀上，推薦循環(huán)參數(shù)設置：
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循環(huán)45次;單點熒光檢測在60℃，反應體系為25?l。
熒光通道檢測選擇：選用FAM通道。
Bcl3 ELISA Kit富含亮氨酸重復家庭蛋白3抗體B-細胞淋巴瘤因子3(Bcl3)ELISA試劑盒
Bcl2 ELISA Kit富含亮氨酸重復蛋白10抗體B-細胞淋巴瘤因子2(Bcl2)ELISA試劑盒
Bcl10 ELISA Kit富含亮氨酸重復家庭蛋白2抗體B-細胞淋巴瘤因子10(Bcl10)ELISA試劑盒
BLNK ELISA Kit富含亮氨酸重復死亡結構域蛋白抗體B-細胞連接蛋白(BLNK)ELISA試劑盒
BAFFR ELISA Kit層粘連蛋白受體1抗體B-細胞激活因子受體(BAFFR)ELISA試劑盒
BAFF ELISA Kit層粘連蛋白受體1抗體B-細胞激活因子(BAFF)ELISA試劑盒
IκBKβ ELISA Kit磷酸化淋巴增強因子-1抗體B-細胞κ-輕肽基因增強子抑制因子激酶β(IκBKβ)ELISA試劑盒
BLC1 ELISA Kit層粘連相關多肽蛋白1抗體B-淋巴細胞趨化因子1(BLC1)ELISA試劑盒
LAB7-2 ELISA Kit淺表層粘膜蛋白多糖抗體B-淋巴細胞激活抗原B7-2(LAB7-2)ELISA試劑盒
BLK ELISA Kit調(diào)控胚胎干細胞分化蛋白Lhx2抗體B-淋巴酪氨酸激酶(BLK)ELISA試劑盒
SCARB1 ELISA KitLRRC2蛋白抗體B類清道夫受體1(SCARB1)ELISA試劑盒
BAGE5 ELISA Kit神經(jīng)突觸蛋白NGL3抗體B-黑色素瘤抗原5(BAGE5)ELISA試劑盒
BAGE4 ELISA Kit致盲基因LCA5樣蛋白抗體B-黑色素瘤抗原4(BAGE4)ELISA試劑盒
BAGE3 ELISA Kit致盲基因LCA5蛋白抗體B-黑色素瘤抗原3(BAGE3)ELISA試劑盒
BAGE2 ELISA Kit轉錄因子LHX6抗體B-黑色素瘤抗原2(BAGE2)ELISA試劑盒
BAGE ELISA Kit磷酸化腫瘤抑制基因LATS1/LATS2抗體B-黑色素瘤抗原(BAGE)ELISA試劑盒
BANP ELISA Kit轉錄因子LBX1抗體BTG3關聯(lián)核蛋白(BANP)ELISA試劑盒
BRAF ELISA Kit神經(jīng)細胞特異性轉錄因子LDB1抗體B-Raf原癌基因絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(BRAF)ELISA試劑盒
BMPER ELISA Kit白細胞細胞化學吸引素2抗體BMP結合內(nèi)皮調(diào)節(jié)因子(BMPER)ELISA試劑盒
BAMBI ELISA KitLHX5蛋白抗體BMP激活素膜結合抑制因子同源物(BAMBI)ELISA試劑盒
BPn ELISA Kit單絲氨酸蛋白激酶1+2抗體Biopyrrin蛋白(BPn)ELISA試劑盒
Bid ELISA KitLIN7C蛋白抗體BH3相互作用域死亡激動劑(Bid)ELISA試劑盒
BCL2L11 ELISA Kit富含亮氨酸重復序列Nogo受體反應蛋白4抗體Bcl2樣蛋白11(BCL2L11)ELISA試劑盒
MCL1 ELISA Kit富含亮氨酸α2糖蛋白抗體Bcl2相關髓細胞白血病序列1(MCL1)ELISA試劑盒
BAK1 ELISA Kit腦特異性磷脂酸磷酸酶樣蛋白1抗體Bcl2拮抗/殺傷因子1(BAK1)ELISA試劑盒
BAG3 ELISA Kit跨膜蛋白TMEM176B抗體Bcl2關聯(lián)永生基因3(BAG3)ELISA試劑盒
Bax ELISA Kit富含亮氨酸重復跨膜神經(jīng)元蛋白2抗體Bcl2關聯(lián)X蛋白(Bax)ELISA試劑盒
BTS ELISA Kit富含亮氨酸重復跨膜神經(jīng)元蛋白4抗體Battenin蛋白(BTS)ELISA試劑盒
BSN ELISA KitLZIC蛋白抗體Bassoon蛋白(BSN)ELISA試劑盒
AXOT ELISA KitLgi3蛋白抗體Axotrophin蛋白(AXOT)ELISA試劑盒
AXIN2 ELISA KitLhx4蛋白抗體Axis抑制蛋白2(AXIN2)ELISA試劑盒
ATRN ELISA Kit信號轉導分子SCDO3抗體Attractin蛋白(ATRN)ELISA試劑盒
ATN1 ELISA KitRNA聚合酶相關蛋白LEO1抗體Atrophin1蛋白(ATN1)ELISA試劑盒
ABCG2 ELISA Kit淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎病毒蛋白抗體ATP結合盒轉運蛋白G2(ABCG2)ELISA試劑盒
ABCG1 ELISA Kit自噬微管相關蛋白輕鏈3A/3B抗體ATP結合盒轉運蛋白G1(ABCG1)ELISA試劑盒
ABCA4 ELISA Kit黃體激素釋放激素/促性腺激素釋放激素抗體ATP結合盒轉運蛋白A4(ABCA4)ELISA試劑盒
ABCA3 ELISA KitLRRC23蛋白抗體ATP結合盒轉運蛋白A3(ABCA3)ELISA試劑盒
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
