注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 編號 |
豬腸道甲型科研PCR檢測試劑盒說明書 | Swine Enteric Alphacoronavirus(SeACoV)PCR | YS-R4107 |
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使用及效果:
CR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
豬腸道甲型科研PCR檢測試劑盒說明書組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中Z小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
英文名稱:Porcine angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝規(guī)格:96T/48T111853-201001供含量測定用*:*:王不留行黃酮苷規(guī)格:20mg
英文名稱:Porcine Factor-related Apoptosis,FAS ELISA Kit豬凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒 進(jìn)口/原裝規(guī)格:96T/48T111854-201001供含量測定用*:*:槲皮素-3-O-β-D- 葡萄糖規(guī)格:20mg
英文名稱:Porcine B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2 ELISA Kit豬B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T111855-201001供含量測定用*:*:偽原薯蕷皂苷(暫行)規(guī)格:20mg
英文名稱:Porcine Bcl-2 Assaciated X protein,BAX ELISA Kit豬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒 *規(guī)格:96T/48T111856-201001供含量測定用*:*:巴豆苷規(guī)格:20mg
英文名稱:Porcine nitric oxide,NO ELISA Kit豬一氧化氮(NO)ELISA試劑盒進(jìn)口/分裝規(guī)格:96T/48T111857-201001供含量測定用*:*:新橙皮苷規(guī)格:20mg
英文名稱:Porcine Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒進(jìn)口/原裝規(guī)格:96T/48T111858-201001供含量測定用*:*:絡(luò)石苷規(guī)格:20mg
規(guī)格:50mg常溫,避光 鑒別*:枸椽酸已定雞蛋卵黃高磷蛋白磷酸肽(PPP)ELISA Kit,48T/96T
規(guī)格:50mg2-8℃,避光含量測定*:維A酸家蠶卵黃蛋白(LT)ELISA Kit,48T/96T
規(guī)格:100mg常溫,避光含量測定*:噻嗪雞卵黃免疫球蛋白(IgY)ELISA Kit,48T/96T
規(guī)格:50mg常溫,避光含量測定*:鹽酸阿米洛利α-銀環(huán)蛇毒素(α-BGT)ELISA Kit,48T/96T
規(guī)格:50mg常溫,避光檢查用*:3,5-二氨基-6-吡嗪-2-羧酸酯人細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)ELISA Kit,48T/96T
規(guī)格:50mg常溫,避光檢查用*:噻啶人整合素αM型(ITG αM/CD11b) ELISA Kit,48T/96T
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。