試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。
產(chǎn)品名稱 | 人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human calf intestinal alkaline phosphatase (CIAP) ELISA Kit |
貨號 | YS-H11906 |
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
膜相關(guān)環(huán)指蛋白10抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:42073
組織相容性復(fù)合體蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:MHC class I
磷酸化卡波西氏瘤皰疹病毒潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-MLF1 Interacting Protein(Thr78)
組織相關(guān)抗原HLA-B15抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:MHC class I antigen B 15
生長抑制蛋白NDN抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:Necdin
利鈉肽受體C抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:NPRC
谷氨酸受體2C抗體(N端) 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:NMDAR2C
NADH氧化還原酶輔酶1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:NDUFA1
巢蛋白/神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Nestin
雞新城疫疫苗(雞瘟4型混合病毒)抗體 規(guī)格: 1ml 英文名稱:Newcastle disease virus
NCK銜接蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:Nck beta
尾部結(jié)構(gòu)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Cenexin1
陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:SLC22A6
蛋白酶活化受體4抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:PAR4
人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA檢測試劑盒大鼠活性氧(ROS)ELISA試劑盒 英文名: ROS ELISA Kit
大鼠活化素B(ACV-B)ELISA試劑盒 英文名: ACV-B ELISA Kit
大鼠活化素A受體抗體IgM(ACV-RAb IgM)ELISA試劑盒 英文名: ACV-RAb IgM ELISA Kit
大鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒 英文名: ACV-A ELISA Kit
大鼠活化凝血因子X(FXa)ELISA試劑盒 英文名: FXa ELISA Kit
大鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒 英文名: APC ELISA Kit
大鼠磺基轉(zhuǎn)移酶(SULT1A1)ELISA試劑盒 英文名: SULT1A1 ELISA Kit
大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒 英文名: LHRH ELISA Kit
大鼠黃體生成素(LH)ELISA試劑盒 英文名: LH ELISA Kit
大鼠黃嘌呤氧化酶(XOD)ELISA試劑盒 英文名: XOD ELISA Kit
大鼠環(huán)磷腺苷(cAMP)ELISA試劑盒 英文名: cAMP ELISA Kit
大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒 英文名: cAMP ELISA Kit
大鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒 英文名: cGMP ELISA Kit
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。