NADP蘋(píng)果酸酶(NADPME)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品：神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1抗體TORC1/CRTC1/FITC 熒光su標(biāo)記環(huán)腺應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體IgG
神經(jīng)膠質(zhì)生長(zhǎng)因子/神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白β抗體Torc2/Crtc2/FITC 熒光su標(biāo)記CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體IgG
甲基化多聚腺結(jié)合抗體植物組織可溶性膜粗提制備試劑盒
太平洋硫膨大桿菌植物組織可溶性
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
NADP蘋(píng)果酸酶(NADPME)測(cè)試盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | BJ-0161120-1 |
商品介紹:
測(cè)定意義： ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物和植物胞漿中，尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋(píng)果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng)，產(chǎn)生丙酮酸和CO2，以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng)，是蘋(píng)果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來(lái)植物ME活性測(cè)定較多，已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點(diǎn)。根據(jù)fu酶專一性和對(duì)底物特異性的不同，可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。 測(cè)定原理： NADP-ME催化NADP+還原成NADPH，在340nm下測(cè)定NADPH增加速率。 需自備的儀器和用品： 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。 |
優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
測(cè)定步驟：
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋：將試劑三用蒸餾水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。
3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測(cè)定樣本較少，可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完）。
5、 樣本測(cè)定（在96孔板中依次加入下列試劑）充分混勻，室溫靜置30min后，450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。
注意事項(xiàng)：
待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。
一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢，其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝，以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋；當(dāng)樣品為血液等無(wú)需處理的樣品時(shí)，宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾，例如0.1mM ascorbic acid，5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色，如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3，就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
色an酸羥化酶抗體細(xì)枝孢大鼠腎足突*培養(yǎng)基
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體抗體嗜麥芽黃單胞菌大鼠頸上皮*培養(yǎng)基
轉(zhuǎn)甲狀腺su蛋白/前白蛋白抗體樟疫霉小鼠肝實(shí)質(zhì)*培養(yǎng)基
端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗體簡(jiǎn)青霉大鼠角膜上皮*培養(yǎng)基
酪an酸激酶A抗體Enterobacter sp.大鼠腦靜脈血管平滑肌*培養(yǎng)基
腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗體鼠李糖乳桿菌大鼠小梁網(wǎng)*培養(yǎng)基
腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗體平流層芽孢桿菌大鼠內(nèi)臟脂肪*培養(yǎng)基
微管相關(guān)蛋白抗體黃曲霉小鼠淋巴管內(nèi)皮*培養(yǎng)基
Tar DNA 結(jié)合蛋白43抗體植物乳桿菌植物亞種大鼠小腦顆粒*培養(yǎng)基
粘合su(固生蛋白)抗體玉米黑粉菌大鼠腎實(shí)質(zhì)*培養(yǎng)基
三葉肽因子3抗體香菇大鼠平滑肌*培養(yǎng)基
組織因子途徑抑制劑-2抗體葡萄座腔菌大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)*培養(yǎng)基
轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子α抗體(TGFα)亞褐鈸孔菌大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮*培養(yǎng)基
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1抗體（TGFβ1）*百脈根根瘤菌大鼠腸粘膜上皮*培養(yǎng)基
轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β2抗體（TGFβ2）多主葡萄殼菌小鼠肝內(nèi)膽管上皮*培養(yǎng)基
NADP蘋(píng)果酸酶(NADPME)測(cè)試盒微量法Toll樣受體2(TLR2)試劑盒Anti-CUL2 Antibody磷酸化周期檢查控制蛋白質(zhì)
鞘磷脂(SM/SPH)試劑盒 Anti-CUL3 Antibody磷酸化減數(shù)分裂重組蛋白家族REC8
轉(zhuǎn)錄激活因子6(ATF6)試劑盒 Anti-CUL4B AntibodyATP依賴解旋酶RENT1
26S蛋白mei體(26S-PSM)試劑盒 Anti-CUL2 AntibodyRas相關(guān)雌調(diào)節(jié)生長(zhǎng)抑制蛋白
阿黑皮su原(POMC)試劑盒Anti-CUL4A Antibody核酮糖1,5二磷酸羧化酶
抗乙酰受體(Anti-AChR)試劑盒Anti-CX3CL1 Antibody急性髓白血病1蛋白
血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)試劑盒Anti-CXCL1 Antibody指狀蛋白R(shí)ET
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
