商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品分類 | 規(guī)格 | 貨號 |
Topoisomerase I (Vaccinia virus) | 克隆載體及相關(guān)產(chǎn)品 | 100U | BJ-PJ6555 |
描述：
該 Topoisomerase I 來源于牛痘病毒（vaccinia virus），通過基因重組方案制備純化。其能解旋DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)，除此外其能識別并切割雙鏈 DNA 末端 [5’C(T)CCTT↓]，并且與 DNA 形成共價(jià)連接形成穩(wěn)定復(fù)合物。該共價(jià)復(fù)合物遇到DNA 的5’-OH基團(tuán)后，重新連接形成完整 DNA 鏈。因此，使用該酶可作為 DNA 連接的有效工具，可用于 DNA 的載體連接（TOPO 克隆載體制備）、接頭連接（NGS 建庫）等實(shí)驗(yàn)。
應(yīng)用
DNA-載體連接
接頭連接
儲(chǔ)存：-20°C 可保存 3 年。
TOPO 酶保存液：20mM Tris-HCl，pH7.8，150mM NaCl，
0.1% Tween20，50%甘油。
反應(yīng)實(shí)例 1（質(zhì)粒解旋）
10×TOPO Buffer 2.5 μl
超螺旋質(zhì)粒 DNA 1-20 μg
Vaccinia TOPO (5pmol/μl) 1 μl
ddH2O Up to 25 ul
37°C 孵育 5-15min。
反應(yīng)實(shí)例 2（接頭連接）
10×TOPO Buffer 2.5 μl
2 M NaCl 2.5 μl
接頭 A(含 CCCTT) 5-100 pmol
接頭 B(含 5‘OH) 5-100 pmol
Vaccinia TOPO (5pmol/μl) 1 μl
ddH2O Up to 25 ul
37°C 孵育 5-15min。
注意：（1）雙鏈接頭 A 通常 5’做 NH2 封閉修飾，以防止自連接；接頭 A 的 CCCTT 后通常包含 5-12bp 尾巴，再長的尾巴會(huì)導(dǎo)致連接效率大幅下降；
（2）雙鏈接頭 B 的 5’端必須包含-OH。
（3）由于該酶應(yīng)用廣泛，在不同的實(shí)驗(yàn)中使用策略不同，需要靈活運(yùn)用。該類實(shí)驗(yàn)請根據(jù)文獻(xiàn)）進(jìn)行調(diào)整。
下列是公司正在出售的產(chǎn)品：
鋅指蛋白169抗體 英文名；ZNF169 | 細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白46抗體 英文名；IFT46 |
γ-銜接蛋白相關(guān)蛋白2抗體 英文名；GGA2 | TBC結(jié)構(gòu)域家族D13蛋白抗體 英文名；TBC1D13 |
c-Myc tag標(biāo)簽抗體 | 辣根過氧化物酶標(biāo)記的冠狀病毒2核衣殼蛋白抗體 |
磷酸化蛋白激酶B單克隆抗體 英文名；phospho-AKT (Ser473) | APC標(biāo)記人CD86單克隆抗體 |
CMBL蛋白抗體 英文名；CMBL | 跨膜蛋白16A/鈣激活氯離子通道抗體 英文名；ANO1 |
微管蛋白β3（神經(jīng)標(biāo)志物）單克隆抗體 英文名；TUBB3 (Neuronal Marker) | APC標(biāo)記人CD83單克隆抗體 英文名；human CD83/APC |
ras癌基因家族Rab5蛋白抗體 英文名；RAB5A | 絲束蛋白T Plastin抗體 英文名；PLASTIN3 |
堿性成纖維細(xì)胞生長因子單克隆抗體 | PE-Cy5標(biāo)記人CD33單克隆抗體 英文名；human CD33/PE-Cy5 |
9號染色體開放閱讀框21抗體 | 肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin單克隆抗體 |
鉀離子通道蛋白Kir7.1抗體 英文名； | 19號染色體開放閱讀框67抗體 |
9號染色體開放閱讀框174抗體 英文名；C9orf174 | 環(huán)指蛋白40抗體 英文名；RNF40 |
細(xì)胞周期調(diào)控因子10抗體 | 19號染色體開放閱讀框66抗體 英文名；C19orf66 |
鋅指蛋白32抗體 | Topoisomerase I (Vaccinia virus)磷酸化核因子κB抑制蛋白α抗體體 |
