ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱 | Ⅳ型膠原ELISA試劑盒免費(fèi)包郵 |
英文名稱 | Collagen TypeⅣ |
貨號(hào) | FS-P64793 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
磷脂酶A2激活蛋白抗體英文全稱Trefoil Factor-2英文簡(jiǎn)稱TFF2檢測(cè)范圍7268nmol/L-80pg/mL
胸苷磷酸化酶抗體英文全稱Serotonin Transporter 英文簡(jiǎn)稱SERT檢測(cè)范圍7269nmol/L-1600pg/mL
早老素蛋白-2抗體英文全稱5-Hydroxytryptamine 1A英文簡(jiǎn)稱5-HT1A檢測(cè)范圍7270nmol/L-240ng/ml
piwi樣2蛋白抗體英文全稱Collagen I英文簡(jiǎn)稱Col I檢測(cè)范圍7271nmol/L-64ng/mL
豬瘟抗體英文全稱Collagen II英文簡(jiǎn)稱Col II檢測(cè)范圍7272nmol/L-40ng/mL
脂滴包被蛋白Perilipin-A抗體英文全稱dystrophin英文簡(jiǎn)稱Dys檢測(cè)范圍7273nmol/L-20ng/ml
多聚腺苷酸結(jié)合蛋白抗體英文全稱Glutathione peroxidase英文簡(jiǎn)稱GSH-PX檢測(cè)范圍7274nmol/L-800U/L
兒茶酚氧化酶PPO抗體英文全稱·OH英文簡(jiǎn)稱·OH檢測(cè)范圍7275nmol/L-100U/ml
髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激酶抗體英文全稱antioxidant enzyme英文簡(jiǎn)稱anti-enzyme檢測(cè)范圍7276nmol/L-400U/mL
磷酸化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激酶抗體英文全稱Calcineurin英文簡(jiǎn)稱CaN檢測(cè)范圍7277nmol/L-80U/L
磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體α英文全稱O2·英文簡(jiǎn)稱O2·檢測(cè)范圍7278nmol/L-240pg/mL
磷酸甲羥戊酸激酶抗體英文全稱caenorhabditis elegans death gene英文簡(jiǎn)稱CED-3檢測(cè)范圍7279nmol/L-20ng/ml
磷脂轉(zhuǎn)移蛋白抗體英文全稱caenorhabditis elegans death gene英文簡(jiǎn)稱CED-9檢測(cè)范圍7280nmol/L-12ng/ml
磷酸肌磷脂酶PLCZ1抗體英文全稱Aquaporin英文簡(jiǎn)稱AQP檢測(cè)范圍7281nmol/L-800pg/mL
磷脂酸磷酸酶2b抗體英文全稱H2A Histone Family, Member X英文簡(jiǎn)稱H2AFX檢測(cè)范圍7282nmol/L-4000pg/mL
RNA聚合酶1和轉(zhuǎn)錄釋放因子抗體英文全稱lipid peroxlde英文簡(jiǎn)稱LPO檢測(cè)范圍7283nmol/L-32ng/mL
靈芝烯酸DRalB Antibody100 ul
靈芝酸DUCHL1 Antibody100 ul
大豆皂苷AcUCHL3 Antibody100 ul
擬人參皂苷Rh2RalA Antibody1 Kit
阿樸-12'-番茄紅素醛AMPK Substrate Antibody Sampler Kit100 ul
孕甾烯酮Ezh2 (AC22) Mouse mAb (PE Conjugate)100 ul
大戟因子L1CD31 (PECAM-1) (89C2) Mouse mAb100 ul
13-去羥印烏堿SDF1 (D32F9) Rabbit mAb100 ul
Ⅳ型膠原ELISA試劑盒免費(fèi)包郵人單胺氧化酶(MAO)ELISA Kit，48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用
鼠白介素7(IL-7)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Clostridium algifaecis
大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Aspergillus fumigatus
人血管緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Micromonospora nigra
人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Phomopsis truncicola
人血管緊張素Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)ELISA Kit，48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用
人葡萄糖激酶(GCK)ELISA Kit，48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用
人血管生成素4(ANG-4)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Pseudomonas eucalypticola
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
