ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱 | UK人尿激酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human urokinase, UK Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63842 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
阿司匹林有效期: 1年級(jí)別: USP Grade溶解性: 0.1g/ml乙醇來(lái)源: 合成
4-甲基-7-乙酰氧基-β-D-葡萄糖醛苷有效期: 2年級(jí)別: Bioch Grade溶解性: 1 mg/mL in war別名: 4MUG，4-MUG，4-甲基傘型-beta-D-葡糖苷; 4-甲基傘花基-beta-D-葡糖苷; 4-甲基-2-氧代-2H-1-并吡喃-7-基-beta-D-葡糖苷
4-甲基傘形有效期: 4年溶解性: 20mg/ml 1 N NaOH別名: ß-Methylumbelliferone； 4-MU； 7-Hydroxy-4-methylcoumarin: 90-33-5
磺胺甲惡唑 有效期: 2年別名: 3-對(duì)氨基磺酰胺基-5-甲基噁唑英文名稱: Sulfamethoxazole: 723-46-6
羥基脲有效期: 3年級(jí)別: CP溶解性: 100mg/ml in War別名: 氨甲酰羥基胺;羥基脲;羥基尿素;N-羥基脲;氨基甲?；u胺;羥[基]脲;羥基尿;羥基脲,98%
非那西丁有效期: 3年級(jí)別: USP Grade溶解性: 50mg/ml EtOH來(lái)源: 合成
乙螨唑有效期: 2年英文名稱: Etoxazole: 153233-91-1分子式: C21H23F2NO2
卡托普利有效期: 2年級(jí)別: USP Grade溶解性: 50 mg/mlWar英文名稱: Captopril
UK人尿激酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理TRPM2 瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白抗體（M亞家族）錨蛋白重復(fù)域28抗體二乙氧基二苯基硅烷Mouse FGF9 (Fibroblast Growth Factor 9) ELISA Kit
c/Troponin T 心肌特異性肌鈣蛋白T抗體淋巴相關(guān)AF4樣蛋白抗體1-(3-氨基)-2-甲基Mouse FGFBP1 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 1) ELISA Kit
TSARG3 生精凋亡相關(guān)基因3抗體錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體1-(3-氨基)-2-甲基Mouse FRS2 (Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 2) ELISA Kit
TSARG4 生精凋亡相關(guān)基因4抗體錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13A抗體N,O-雙(基硅烷基)三乙酰胺Mouse FRS3 (Fibroblast Growth Factor Receptor SubstRate 3) ELISA Kit
TSARG6/DNAJB13 生精凋亡相關(guān)基因6抗體錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體N,O-雙(基硅烷基)三乙酰胺Mouse FMOD (Fibromodulin) ELISA Kit
TSARG7 發(fā)生相關(guān)的新基因抗體錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白1A抗體N,O-雙(基硅烷基)三乙酰胺Mouse FLRT2 (Fibronectin Leucine Rich Transmembrane Protein 2) ELISA Kit
CIDEB CIDEB抗體脂肪特定轉(zhuǎn)錄因子2抗體聚(1,4-丁二丁二)酯Mouse FN (Fibronectin) ELISA Kit
Tsg101 tsg101抗體載脂蛋白L3抗體5--2-苯胺Mouse FLNa (Filamin A) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
