ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產(chǎn)品名稱 | GGT人γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human gamma glutamyl transpeptidase, GGT Elisa Kit |
貨號 | FS-H63424 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Beauveria│brongniartii (Sacc.) Petch 卵孢白僵菌Beauveria│brongniartii (Sacc.) Petch斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no害蟲生物防治14生長條件:28存儲條件:定期移植法 純度:98%
Rhizobium│sp. (Amorpha futicosa) *紫穗槐根瘤菌Rhizobium│sp. (Amorpha futicosa)分離基物:紫穗槐斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no固氮。63生長條件:28-30存儲條件:定期移植法 純度:98%
Dictyophora│echinovolvata M. Zang D. R. Zheng & Z. X. Hu #托竹蓀Dictyophora│echinovolvata M. Zang D. R. Zheng & Z. X. Hu斜面培養(yǎng)物模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:≥99%
Fusarium│sp. #鐮刀菌Fusarium│sp.斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98%
Dictyophora│duplicata (Bosc) E. Fisch. 短裙竹蓀3-3Dictyophora│duplicata (Bosc) E. Fisch.分離基物:毛竹林子實體斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:28存儲條件:定期移植法 純度:98%
Dictyophora│duplicata (Bosc) E. Fisch. 短裙竹蓀3-5Dictyophora│duplicata (Bosc) E. Fisch.分離基物:毛竹林子實體斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:28存儲條件:定期移植法 純度:98%
Tuber│mdicum cook et Massee 塊菌Tuber│mdicum cook et Massee分離基物:子實體斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:28存儲條件:定期移植法 純度:98%
Dictyophora│duplicata (Bosc) E. Fisch. 短裙竹蓀2號(毛竹林)Dictyophora│duplicata (Bosc) E. Fisch.分離基物:子實體斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98%
GGT人γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶ELISA試劑盒實驗原理SIGLEC10/SLG2 唾液結合性免疫球蛋白樣凝集素抗體波必利乙酰鉿Human CNN1 (Calponin 1, Basic, Smooth Muscle) ELISA Kit
Cdc6 分裂周期蛋白6抗體異丁司特Human Anti-AChR (Anti-Acetylcholine Receptor Antibody) ELISA Kit
CD339/Jagged1 Jagged1/CD339抗體異環(huán)磷酰胺 Human CNTNAP2 (Contactin Associated Protein Like Protein 2) ELISA Kit
Sialic14 唾液結合性免疫球蛋白樣凝集素14抗體沙坦Human ACHAP (Acetylcholinesterase Associated Protein) ELISA Kit
SIGLEC11 唾液結合性免疫球蛋白樣凝集素11抗體他胺Fmoc-Hyp(Bzl)-OHHuman ACO1 (Aconitase 1) ELISA Kit
Cdc34/UBC3 周期調(diào)控因子34鹽氨溴索(R,R)-DACH-萘基 Trost 配體Human CPE (Carboxypeptidase E) ELISA Kit
CDC42 分化周期CDC42蛋白抗體洛伐他汀(R,R)-DACH-萘基 Trost 配體Human Anti-GM1 (Anti-Ganglioside M1 Antibody) ELISA Kit
Phospho-CDC42 (Ser71) 磷化分化周期CDC42蛋白抗體辛伐他汀1-丁基-3-甲基咪唑磺鹽Human CGα (Chorionic Gonadotropin Alpha Polypeptide) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準