一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(最好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱:以色列急性癱瘓病毒PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Israeli Acute Paralysis VirusPCR
貨號(hào):BJ-P6900
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)外包:
基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、使用方法:
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲(chǔ)存條件:-20℃以下,有效期12個(gè)月。
2 ug pET-42a(+) pET-42a(+) 低溫運(yùn)輸,-20℃保存進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)1公斤
5mL Phosphatase Inhibitors Cocktail-I Phosphatase Inhibitors Cocktail-I 常溫保存 7.8-500 U/mL ELISA Kit for Human Superoxide dismutase [Cu-Zn]
100支 1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭(盒裝已滅菌帶芯) 常溫 0.156-10 ng/mL 人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒
50T 紅薯內(nèi)源基因PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存Fraser添加劑進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Fraser Supplement10毫升添加到HB4193中,用于李氏菌的選擇性
賴培養(yǎng)基(LYS) 250g 0.312-20 ng/mL 人毒性T淋巴相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA試劑盒
30次 一站式CTAB-PAGE電泳套裝 0.156-10 ng/mL 人TNF受體相關(guān)因子6(TNF receptor-associated factor 6)ELISA試劑盒
25g L- 甲硫 L-Methionine 室溫密封避光保存 0.156-10 ng/mL 人泛素蛋白連接E3成分N識(shí)別蛋白1(E3 ubiquitin-protein ligase UBR1)ELISA試劑盒
1瓶 PC12株 PC12 低溫運(yùn)輸和保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human NT-proBNP
1瓶 HT-29(RFP)株 HT-29(RFP) 低溫運(yùn)輸和保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Retinoic acid receptor beta
100 mL DMEM培養(yǎng)基(高糖,含10%胎牛血清) Cell Culture Medium -20℃保存
2 ug pGADT7-T pGADT7-T 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Dual specificity protein phosphatase 4
以色列急性癱瘓病毒PCR熒光定量檢測(cè)試劑盒AZD5363 AKT激酶抑制劑(AZD5363) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
MHY1485 mTOR激活劑(自噬抑制劑) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
AMG 232 p53-MDM2相互作用抑制劑(AMG 232) 2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
SIS3 Smad3抑制劑(SIS3) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg
BI 2536 Plk1抑制劑(BI 2536) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Mocetinostat HDAC抑制劑(Mocetinostat) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
S63845 MCL1抑制劑(S63845) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
GSK343 EZH2抑制劑(GSK343) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
RSL3 GSH過氧化物酶4抑制劑(RSL3) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
Lenvatinib VEGFR2和VEGFR3抑制劑(Lenvatinib) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
KN-93 神經(jīng)元CaMK-II抑制劑(KN-93) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg