實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
鯉春病毒(SVCV)核酸檢測試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10399 |
PCR技術(shù)的定量原理：
?
擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于液中。
PCR檢測試劑盒：
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
非洲黑蛋巢生長條件: 25℃培養(yǎng)基: 14提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結(jié)法；定期移植法；其他
植物乳桿菌植物亞種發(fā)酵乳類，用于益生菌類保健食品。模式菌株: no發(fā)酵牦牛乳提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0006生長條件: 37℃
-491℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥
青霉屬活性物質(zhì)；抗炎模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28C
HBUM80981模式菌株: no安全等級: 1種屬: Streptomyces│sp.土壤提供形式: 凍干物培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃
山茶刺盤孢培養(yǎng)基: 14模式菌株: no葉片提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 26 定期移植法
意大利青霉培養(yǎng)基: CM0014工業(yè)用防腐劑的效果檢測提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 24-28℃ 真空冷凍干燥法；定期移植法
聚團(tuán)拉布倫茨氏菌培養(yǎng)基: 471南大西洋細(xì)菌水樣/深海海水提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
杉葉散斑殼培養(yǎng)基: 14模式菌株: no針葉提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 26 定期移植法
-492℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥
谷氨棒桿菌培養(yǎng)基: CM0002產(chǎn)谷氨。提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 30℃ 真空冷凍干燥法
釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0077面包提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
蘇云金芽孢桿菌培養(yǎng)基: CM0002殺雙翅目昆蟲提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28℃ 真空冷凍干燥法
芽胞桿菌培養(yǎng)基: 471微生物/耐冷菌水樣/表層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 15℃ 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
44655研究模式菌株: no種屬: Mycobacterium│Mycobacterium intracellulare提供形式: 凍干物安全等級: 3生長條件: 37 真空冷凍干燥法
棲珊瑚假交替單胞菌污染物降解微生物/潛在石油烴類降解菌模式菌株: no水樣/表層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 821生長條件: 4℃
聚蛋白胨Poly peptone日本500g
P2636-10MGPoly-L-Lysine L-多聚賴安 3-7萬--10mg50
E0219-1GErythromycin 紅霉素114-07-81g
蛋白酶抑制劑(動物)1ml
N6-Benzoyladenine
乙乙酯¤etxyl acetate進(jìn)口 HPLC4L
PCR-05-C0.5 ml PCR薄壁管228
P0242-1GPenicillin G,wo7ium salt 青霉素G鈉鹽69-57-81g
dATP1g
Endo-free Plasmid Mini Kit100T
大鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人心肌肌球蛋白重鏈(MHC)自身抗體免疫試劑盒 Human cardiac myosin heavy chain (MHC) aoaibody ELISA kit
谷胱甘肽還原酶(GR)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Ratmaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISA試劑盒大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
humanhemochromatosistype2/uvenile-umanhomolog,HFE2LISAKit人青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Humanlipolysaccharidebindingprotein,LBPELISAKit人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鯉春病毒(SVCV)核酸檢測試劑盒7-表紫杉醇105454-04-4英文名：7-Epitaxol
英文別名：Benzenepropanoic acid, beta-(benzoylamino)-alpha-hydroxy-, 6,12B-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2A,3,4,4A,5,6,9,10,11,12,12A,12B-dodecahydro-4,11-dihydroxy-4A,8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1H-cyclodeca(3,4)benz(1,2-B)oxet-9-yl ester, (2ar- (2aalpha,4alpha,4abeta,6beta,9alpha(alphar*,betas*),11alpha,12alpha,12aalpha,12balpha))
登錄號：105454-04-4
分子式：C47H51NO14
分子量：853.91
分子結(jié)構(gòu)：
外觀：白色結(jié)晶
規(guī)格：20 mg/支
純度：≥ 98%
用途：用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源：紅豆杉屬植物短葉紅豆杉（Taxus brevifolia）
溶解性：溶于乙醇，，，等有機(jī)溶劑
熔點：168~171℃
旋光度：-32.3°（）
藥理藥效：抗腫瘤。
貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
