ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術要求，在檢測過程中除正常反應外，有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有：
①標本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作，必能得出準確的實驗結果，可提供免費技術咨詢服務！
產品名稱 | KLK 8人激肽釋放酶8ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human urokinase-type plasminogen activator, uPA/PLAU Elisa Kit |
貨號 | FS-H63905 |
公司“質量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿，細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
化二基鎓有效期: 2年溶解性: 0.5g/mL in CHCL3英文名稱: Diphenyliodonium Iodide: 2217-79-0
4-氧別名: 對氧;對氧醋;促生靈;番茄通;p-氧;防落素;防落壯果劑英文名稱: IUPAC: 122-88-3分子式: C8H7ClO3
2,6-二吡-4-甲別名: 2,6-二異煙;2,6-二吡-4-甲;2,6-二吡-4-羧英文名稱: 2,6-Dichloropyridine-4-carboxylic acid: 5398-44-7分子式: C6H3Cl2NO2
雙(4-硝基基)磷酯有效期: 2年溶解性: 20mg/ml in hot war英文名稱: Bis(4-nitrophenyl)phosphoric acid: 645-15-8
1,6-二基-1,3,5-己三烯別名: 1,6-二基-1,3,5-己三烯;二肉桂酰;DPH英文名稱: 1,6-Diphenyl-1,3,5-hexatriene: 1720-32-7分子式: C18H16
DL-炔丙基甘氨溶解性: 20mg/mL in War別名: DL-炔丙基甘氨;2-Amino-4-PentynoicAcid英文名稱: DL-Propargylglycine: 50428-03-0
辛別名: 2-丁氧基-N-(2-二乙基氨基乙基)喹啉-4-甲酰胺;地布卡因;辛;辛可(地布)卡因;辛可基;地布卡因基;2-Butoxy-N-[2-(Diethylamino)-Ethyl]-4-QuinolineCarboxamide;2-Butoxy-N-[2-(Diethylamino)Ethyl]Cinchonamide;2-Butoxy-n-(2-Diethylaminoethyl)Qu英文名稱: Cinchocaine: 85-79-0分子式: C20H29N3O2
對氨基二乙基鹽別名: 4-氨基-N，N-二乙基鹽;對氨基-N,N-二乙基鹽;對氨基二乙基;二乙基對二胺鹽;N,N'-二,4-二胺鹽;N,N-二乙基對二胺鹽英文名稱: TSS: 6283-63-2分子式: C10H16N2·H2SO4
KLK 8人激肽釋放酶8ELISA試劑盒實驗原理ASK1/MAPKKK5 /FITC 熒光素標記凋亡信號調節(jié)激酶1/絲裂原活化蛋白激酶激酶激酶5抗體IgG琥珀裂解酶抗體三(3,5-二叔丁基-4-羥芐基)異脲酯Mouse PKR1 (Prokineticin Receptor 1) ELISA Kit
ASK1(phospho Ser83) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、鼠磷化凋亡信號調節(jié)激酶1抗體IgG精氨酰tRNA合成酶抗體4-噻吩 [ 3,2-c ]吡Mouse GPX1 (Glutathione Peroxidase 1) ELISA Kit
phospho-ASK1(Thr845) /FITC 熒光素標記兔抗人、鼠磷化凋亡信號調節(jié)激酶1抗體IgG真核翻譯起始因子2C3抗體4-噻吩 [ 3,2-c ]吡Mouse PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen) ELISA Kit
ASK1(phospho Ser967) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、鼠磷化凋亡信號調節(jié)激酶1抗體IgG真核翻譯起始因子2C4抗體1,5-雙(二苯基膦)戊烷Mouse POMC (Proopiomelanocortin) ELISA Kit
ASPP1/FITC 熒光素標記p53凋亡激蛋白1抗體IgGRho GTP酶激活蛋白15抗體1,5-雙(二苯基膦)戊烷Mouse PGD2S (Prostaglandin D2 Synthase) ELISA Kit
ASPP2/FITC 熒光素標記P53凋亡激蛋白2抗體IgG抑癌基因結合蛋白ARID1B抗體2,4-二枯基酚Mouse EP2 (Prostaglandin E Receptor 2)ELISA Kit
AT/AGT /FITC 熒光素標記血管緊張素原抗體IgGE3連接酶蛋白ARIH2抗體噻吩-2-Mouse PTGES2 (Prostaglandin E Synthase 2)ELISA Kit
AT1/FITC 熒光素標記血管緊張素I抗體IgGADP核糖基化樣因子1抗體噻吩-2-Mouse PTGES (Prostaglandin E Synthase, Microsomal) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
