ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢(xún)服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
表面趨化因子受體1抗體Anti-OPN  骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1)四氮唑紫(>98%,BS)氨(LPA)ELISA試劑盒

表面趨化因子受體2抗體Anti-Orexin-A  增食欲素-A/欲激素A2-吲哚(>97%，BR)本周蛋白(BJP)ELISA試劑盒

表面趨化因子受體3抗體Anti-Osterix  成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體硫銨鋁十二水(>98%,BR)胞質(zhì)動(dòng)力蛋白(CD)ELISA試劑盒

表面趨化因子受體4抗體Anti-Os05g0477200 protein  水稻白葉枯病菌Os05g0477200蛋白抗體AMP緩沖液(>98%,BR)胞外超氧化物歧化酶(SOD3)ELISA試劑盒

活化半胱蛋白酶蛋白-3抗體Anti-oxytocin receptor  催產(chǎn)素受體(縮宮素受體)抗體并咪唑(>98%,BR)胞漿型磷脂酶A2-α(cPLA2-α)ELISA試劑盒

抗Ⅵ型膠原抗體Anti-OVA  雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體次硝鉍(>98%,BR)胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒

半胱氨蛋白酶8抗體Anti-Orexin receptor 1/2  食欲素受體抗體碳酐酶>3000U/mg胞漿免疫球蛋白(CIg)ELISA試劑盒

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞8抗體Anti-P2P-R/RBBP6  增殖潛能相關(guān)蛋白抗體羧肽酶 B >170 U/mg伴侶蛋白10(CPN10)ELISA試劑盒

表面趨化因子受體10抗體Anti-P14ARF  抑癌因p14抗體碳鈷(II)(>98~102%,BR)半乳糖凝集素7(Gal-7)ELISA試劑盒

轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體Anti-P16  抑癌因p16抗體硝銅三水(>99%,BR)半乳糖凝集素3(Galectin3)ELISA試劑盒

鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體2抗體Anti-P19ARF  p19ARF抑癌因抗體2'-脫氧脫氧胸苷-5'二磷三鈉鹽半乳糖(Galactose)ELISA試劑盒

周期檢測(cè)點(diǎn)激酶1抗體Anti-P21/CDKN1A  p21蛋白抗體半乳糖氧化酶(酶活：> 30 U/mg，BC)半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒

鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1抗體Anti-P27 kip1  P27抗體/周期素依賴(lài)激酶抑制劑3-吲哚(>99%,植物激素級(jí))半胱氨蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒

尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子2/3抗體Anti-P2Y1R/P2ry1  P2Y1受體抗體草亞鐵二水(>99%,BR)板層素相關(guān)多肽2亞型α(TMPO)ELISA試劑盒

周期素H抗體Anti-P2Y4R/P2Ry4  P2Y4受體抗體硝鑭六水(>99%,BR)瘢痕性天皰瘡抗體(CP)ELISA試劑盒
嗜鉻粒蛋白A撫生ELISA試劑盒LPA(Lipoprotein a) ELISA Kit頂青霉拉丁屬名: Penicillium corylophilum

CP(Ceruloplasmin) ELISA Kit扣囊復(fù)膜孢酵母拉丁屬名: Saccharomycopsis fibuligera

CEBPD(CCAAT/enhancer Binding Protein(C/EBP), delta) ELISA Kit黑紫紅菇注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

BAX(Apoptosis regulator BAX) ELISA Kit粘著劍菌用途: 植物冠癭病害，遺傳轉(zhuǎn)化材料

MAPK1(Mitogen-activated protein kinase 1) ELISA Kit喇叭菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

CTLA4(Cytotoxic T-lymphocyte protein 4) ELISA Kit豆芽菌1-2注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

CEACAM1(Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1) ELISA Kit枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus  subtilis

C9(Complement component C9) ELISA Kit球孢白僵菌用途: 生物防治

BCL11B(B-cell lymphoma/leukemia 11B) ELISA Kit單胞菌屬拉丁屬名: Polaromonas  glacialis

CCL28(C-C motif chemokine 28) ELISA Kit枯斑擬盤(pán)多毛孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿(mǎn)板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)