ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產(chǎn)品名稱 | MHB人高鐵血紅蛋白ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Methemoglobin, MHB Elisa Kit |
貨號 | FS-H64229 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
NEGR1 Others Human 人 NEGR1 人裂解液 (陽性對照)
人肝癌;SMMC-7721
3. 毛發(fā)系統(tǒng)
人結直腸腺癌;SW480 [SW 480;SW-480] 大鼠腎管狀上皮*培養(yǎng)基 100mL
PC-12(未分化) 大鼠腎上腺嗜鉻瘤(未分化)
鼠神經(jīng)干
BTG2/TIS21 B遷移基因2抗體規(guī)格: 0.1ml
BTK/ATK 蛋白酪氨激酶ATK抗體規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Btk(Ser180) 磷化蛋白酪氨激酶ATK抗體規(guī)格: 0.1ml
Phospho-Btk(Tyr223) 磷化蛋白酪氨激酶ATK抗體規(guī)格: 0.1ml
C5a 過敏素C5a(補體C5a)抗體規(guī)格: 0.2ml
L,5二戊 L鳥單 鳥
L,5二戊 L鳥單 鳥
L,6二已 L賴 L松 L已 賴CC YB11
L,6二已 L賴 L松 L已 賴CC YB11
L,6二已 L賴 L松 L已 賴CC YB11
L,6二已 L賴 L松 L已 賴CC YB11
L,6二已 L賴 L松 L已 賴CC YB11
l458;lantadin分子式:C25H31NO6分子量:441.52
l458;lantadin分子式:C25H31NO6分子量:441.52
LacNAc備注:
LacNAc備注:
Lactalbumin hydrolysate分子式:分子量:
Lactofen分子式:C19H15CLF3NO7分子量:461.77
Lactofen分子式:C19H15CLF3NO7分子量:461.77
LAlanine分子式:C3H7NO2分子量:89.09
LAlanine分子式:C3H7NO2分子量:89.09
LAlanine分子式:C3H7NO2分子量:89.09
LAlanine分子式:C3H7NO2分子量:89.09
LAlanine分子式:C3H7NO2分子量:89.09
LAlanylLalanine分子式:C6H12N2O3分子量:160.17
早老素1(PSEN1)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: PSEN1 ELISA Kit
Mouse lymphocyte chemotactic factor (Lptn/LTN/XCL1) ELISA Kit 淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)酶聯(lián)免疫試劑盒
MouseIerleukin3,IL-3ELISAKIT 白介素3(IL-3)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit胃腸癌標志物CA199規(guī)格:48T/96T
/組織mRNA直接純化試劑盒10次
ELISAKitTIMP-4基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4規(guī)格:48T/96T
26S蛋白酶體(26S PSM)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊脂多糖/內(nèi)素(LPS)酶聯(lián)免疫試劑盒 Goat Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit
尿微量白蛋白(MAU/ALB)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: MAU/ALB ELISA Kit
Rabbietinolbindingprotein4,RBP-4酶聯(lián)免疫試劑盒視黃結合蛋白4(RBP-4)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanbactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPI酶聯(lián)免疫試劑盒殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanC-ReactiveProtein,CRPELISAKitC反應蛋白(CRP)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
MHB人高鐵血紅蛋白ELISA試劑盒實驗原理卷曲螺旋結構域蛋白80抗體3,5-二硫酚Porcine EPHA3 (Ephrin Type A Receptor 3) ELISA Kit
CD163蛋白樣1抗體2--1,3-二苯Porcine PEDF (Pigment Epithelium Derived Factor ) ELISA Kit
周期素依賴性激酶5調(diào)節(jié)蛋白1樣蛋白1抗體二乙乙酯Porcine PCX (Podocalyxin) ELISA Kit
22號染色體開放閱讀框31抗體二乙乙酯Porcine GAD (Glutamic Acid Decarboxylase) ELISA Kit
分裂周期37樣蛋白1抗體甲中噴布特羅溶液標準物質(zhì)Porcine DHEA-S7 (Dehydroepiandrosterone S7) ELISA Kit
羧肽酶X(M14家族1)抗體PCB 56Porcine PTD (Pentosidine) ELISA Kit
卷曲螺旋結構域蛋白135抗體PCB 74Porcine TNNI2 (Troponin I Type 2, Fast Skeletal) ELISA Kit
跨膜結構域邊緣蛋白CEE抗體2--4,6-二苯基-1,3,5-三Porcine P1 (Caspase 1) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準