ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
利什曼原蟲抗體撫生ELISA試劑盒 | Leishimaria Ab | FS-P65550 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
蛋白酪氨磷酶-1B抗體產(chǎn)品別名: 銣異綠原B(標準品)
Cyclin A1相互作用蛋白抗體產(chǎn)品別名: 亞鋅異綠原C(標準品)
野生型P53誘導因1單克隆抗體產(chǎn)品別名: BOC-L-羥脯氨甲酯異羅漢果皂苷 V
多囊腎蛋白1抗體產(chǎn)品別名: 2-羥-2-酮異芒果苷(標準品)
多囊腎蛋白2抗體產(chǎn)品別名: 氨三甘單甲異牡荊素(標準品)
凋亡相關蛋白4抗體產(chǎn)品別名: 4-溴-3,5-二酚異南五味子木脂寧
磷脂酰肌激酶催化亞單位D抗體產(chǎn)品別名: 4-氨-2-嘧啶異歐前胡素(標準品)
血小板源性生長因子受體β樣蛋白抗體產(chǎn)品別名: 二乙二雙(對甲苯磺酯)異皮啶(標準品)
磷化磷酯酶Cβ3抗體產(chǎn)品別名: α,ω-雙{2-[(3-羧-1-氧)氨]乙}聚乙二異去甲蟛蜞菊內(nèi)酯
磷化蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗體產(chǎn)品別名: α,ω-雙{2-[(3-羧-1-氧)氨]乙}聚乙二異去氫鉤藤堿(標準品)
6磷果糖激酶2抗體產(chǎn)品別名: α,ω-雙{2-[(3-羧-1-氧)氨]乙}聚乙二異珊瑚菜素
磷化6磷果糖激酶2抗體產(chǎn)品別名: 2,5-二溴苯甲異鼠李素(標準品)
磷化磷脂酰肌激酶抗體產(chǎn)品別名: 異化鎂化鋰絡合物異鼠李素-3-O-槐二糖-7-O-鼠李糖苷(標準品)
磷化蛋白激酶C α/β2抗體產(chǎn)品別名: 2--4-甲三氟甲苯異鼠李素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(標準品)
蛋白激酶C α抗體產(chǎn)品別名: 2,3,3--3H-苯并[g]吲哚異鼠李素-3-O-葡萄糖苷(標準品)
利什曼原蟲抗體撫生ELISA試劑盒Human UBE2I(SUMO-conjugating enzyme UBC9) ELISA Kit鵝膏菌屬注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human STAC ELISA Kit丁香輪絲鏈輪絲菌拉丁屬名: Streptoverticillium lilacinoverticillatum
Human SSX5 ELISA Kit土壤小單胞菌拉丁屬名: Pusillimonas soli
Human SSX2IP ELISA Kit黑木耳注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human SRR ELISA Kit*喜溫桿菌拉丁屬名: Acidithiobacillus caldus
Human SRPX2 ELISA Kit菌核鏈霉菌用途: Degrades benzoate
Human SRRM1 ELISA Kit腐爛粘束梗霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human C1QTNF3(Complement C1q tumor necrosis factor-related protein 3) ELISA Kit棒曲霉拉丁屬名: Aspergillus clavatus
Human SRX1(Sulfiredoxin-1) ELISA Kit球孢白僵菌用途: 害蟲生物防治
Human SS18L2 ELISA Kit金9401(金針菇)注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準