ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢(xún)服務(wù)!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
胰蛋白酶原ⅡELISA試劑盒免費(fèi)包郵 | Trypsinogen-2 | FS-P66043 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
整聯(lián)蛋白重復(fù)蛋白3抗體Goat Anti- Rb IgM/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗兔IgM頭孢唑啉(標(biāo)準(zhǔn)品)胞裂蛋白3(SEPT3)ELISA試劑盒
胰島素樣生長(zhǎng)因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白1抗體Goat Anti-rat IgG/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗大鼠IgG文多靈(標(biāo)準(zhǔn)品)胞裂蛋白2(SEPT2)ELISA試劑盒
胰島素樣生長(zhǎng)因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白2抗體Goat Anti-rat IgM/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗大鼠IgM茶堿(標(biāo)準(zhǔn)品)胞裂蛋白14(SEPT14)ELISA試劑盒
磷化整合素β4抗體Goat Anti-Guinea IgG/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗豚鼠IgG酰新烏頭原堿(標(biāo)準(zhǔn)品)胞裂蛋白13(SEPT13)ELISA試劑盒
胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1抗體Mouse Anti-goat IgG/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠抗羊IgG葫蘆巴堿(標(biāo)準(zhǔn)品)胞裂蛋白12(SEPT12)ELISA試劑盒
胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4抗體Mouse Anti-goat IgM/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠抗羊IgM琥珀;丁二胞裂蛋白11(SEPT11)ELISA試劑盒
整合素α7抗體Mouse Anti-human IgG/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠抗人IgG琥珀;丁二(標(biāo)準(zhǔn)品)胞裂蛋白10(SEPT10)ELISA試劑盒
白介素7抗體Mouse Anti-rabbit IgG/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠抗兔IgGα-乳香(標(biāo)準(zhǔn)品)胞裂蛋白1(SEPT1)ELISA試劑盒
白介素6受體α/IL-6Rα抗體Mouse Anti-rat IgG/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠抗大鼠IgG野馬追內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品)胞漿磷蛋白4(STMN4)ELISA試劑盒
白介素9抗體Mouse Anti-rat IgM/FITC 熒光素標(biāo)記小鼠抗大鼠IgM野馬追內(nèi)酯B(標(biāo)準(zhǔn)品)胞漿磷蛋白3(STMN3)ELISA試劑盒
整合素αL抗體Integrin αLRabbit Anti-MK IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗猴IgG長(zhǎng)春瑞濱(標(biāo)準(zhǔn)品)胞漿磷蛋白2(STMN2)ELISA試劑盒
干擾素α抗體Rabbit Anti-MK IgM/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗猴IgM長(zhǎng)春瑞濱(標(biāo)準(zhǔn)品)胞漿磷蛋白1(STMN1)ELISA試劑盒
磷化肌聚磷鹽磷酶樣蛋白1抗體Rabbit Anti-pig IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗豬IgG硝呋太爾胞漿抗蛋白水解酶3(CAP3)ELISA試劑盒
磷化肌聚磷鹽磷酶樣蛋白1抗體Rabbit Anti-Pig IgM/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗豬IgM硝呋太爾(標(biāo)準(zhǔn)品)胞漿抗蛋白水解酶2(CAP2)ELISA試劑盒
抑制素βC抗體Rabbit Anti-Dog IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗狗IgG3-呋喃胞漿多聚A結(jié)合蛋白1樣蛋白(PABPC1L)ELISA試劑盒
胰蛋白酶原ⅡELISA試劑盒免費(fèi)包郵Anti-KITLG Antibody釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Anti-KITLG Antibody葉生布勒擔(dān)子酵母拉丁屬名: Bulleribasidium foliicola
Anti-KLF3 Antibody大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
Anti-KLF4 Antibody圓錐曲霉拉丁屬名: Aspergillus conicus
Anti-KLF4 Antibody單胞菌屬拉丁屬名: Polaromonas glacialis
Anti-KLF4 Antibody產(chǎn)氣莢膜梭菌 素C型拉丁屬名: perfringens Type C
Anti-KLF8 Antibody豬丹絲菌拉丁屬名: rhuriopathiae
Anti-KLF5 Antibody不動(dòng)桿菌用途: 在無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)中以100mg/L的鄰苯二酚為碳源培養(yǎng),3天內(nèi)降解率大于90%
Anti-KLF6 Antibody蘇云金芽孢桿菌肯尼亞亞種拉丁屬名: Bacillus thuringiensis subsp. Kenyae
Anti-KLK1 Antibody變形假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas plecoglossicida
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿(mǎn)板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)