ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產(chǎn)品名稱 | BMP-7小鼠骨成型蛋白7ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Mouse Bone morphogenetic protein 7, BMP-7 Elisa Kit |
貨號 | FS-M64381 |
公司“質量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Raf激酶抑制蛋白英文全稱1,3-Disphosphoglycerate英文簡稱1,3-DPG檢測范圍100nmol/L-3200nmol/L
乙醛脫氫酶家族3成員A1抗體英文全稱1,5-Anhydroglucitol英文簡稱1,5-AG檢測范圍101nmol/L-240μg/mL
磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質/α-晶體蛋白b鏈抗體英文全稱11-dehydro-thromboxane B2英文簡稱11-DH-TXB2檢測范圍102nmol/L-80pg/mL
肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體英文全稱11-dehydro-thromboxane B2英文簡稱11-DH-TXB2檢測范圍103nmol/L-4000pg/mL
三磷酸腺苷結合轉運蛋白G超家族成員2抗體英文全稱l7-ketosteroid英文簡稱17-KS檢測范圍104nmol/L-80μmol/L
毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體英文全稱2-thiothiazolidine-4-carboxylic acid英文簡稱TTCA檢測范圍105nmol/L-48μmol/L
氨肽酶A抗體英文全稱sphingosine 1-phosphate receptor type 3英文簡稱S1P3檢測范圍106nmol/L-2400nmol/L
ATP結合蛋白家族7抗體英文全稱Serotonin Transporter 英文簡稱5-HTT檢測范圍107nmol/L-1600pg/mL
ASCL2蛋白抗體英文全稱 6-pyruvoyl tetrahydrobiopterin synthase英文簡稱PTS檢測范圍108nmol/L-8ng/mL
肌動蛋白相關蛋白M1抗體英文全稱Heat Shock 70 KDa Protein 5英文簡稱HSPA5檢測范圍109nmol/L-1600pg/mL
γ2肌動蛋白抗體英文全稱Collagen Type Ⅸ英文簡稱Ⅸ-C檢測范圍110nmol/L-96ng/mL
激活素受體2A抗體英文全稱adropin英文簡稱AD檢測范圍111nmol/L-400pg/mL
激活素受體2B抗體英文全稱Adaptor-Related Protein Complex 2, alpha 2 Subunit英文簡稱AP2A2檢測范圍112nmol/L-48ng/mL
ATP結合盒轉運蛋白2抗體英文全稱Argonaut2英文簡稱Ago-2檢測范圍113nmol/L-200ng/mL
甲胎蛋白抗體英文全稱DHX9英文簡稱DHX9檢測范圍114nmol/L-16ng/mL
肌動蛋白結合蛋白LIM蛋白3抗體英文全稱B7-1英文簡稱CD80檢測范圍115nmol/L-1600pg/mL
雞滑液囊支原體(MS)核酸檢測試劑盒)Description100 ul
雞馬立克病(MDV)核酸檢測試劑盒)Phospho-Akt Substrate (RXRXXS*/T*) (23C8D2) Rabbit mAb100 ug
雞支原體(MG)核酸檢測試劑盒)Phospho-Histone H3 (Ser10) Blocking Peptide60 ul
鴨瘟病(DPV)核酸檢測試劑盒)Micrococcal Nuclease100 ug
腸炎沙門氏菌(SE)核酸檢測試劑盒)β-Catenin Blocking Peptide100 ul
禽腺病(FADV)核酸檢測試劑盒)CD81 (D5O2Q) Rabbit mAb (Mouse Specific)100 ug
禽傳染性喉氣管炎病(AiLTV)核酸檢測試劑盒)HP1α Blocking Peptide100 ug
新城疫病(NDV)核酸檢測試劑盒)Neurofilament-L Blocking Peptide100 ug
BMP-7小鼠骨成型蛋白7ELISA試劑盒實驗原理EB病核抗原-3B抗體Monomethyl kolava別名: 分子式: C21H32O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 杜虹花;克羅烷型;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
磷化驅動蛋白樣蛋白1抗體15,16-Di-O-acetyldarutoside別名: 分子式: C30H48O10性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 豨薟;海松烷;二萜苷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
乙?;D移酶EID1抗體Hardwickiic acid別名: 分子式: C20H28O3性狀: Powder純度: 97.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 杜虹花;車桑子;克羅烷型;中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
微管相關蛋白EB家族3抗體3-Acetoxy-8(17),13E-labdadien-15-oic acid別名: Aleprolic acid aceta分子式: C22H34O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 水杉;半日花烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
真核翻譯起始因子5抗體ent-17-Hydroxykauran-3-one別名: 分子式: C20H32O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 貝殼杉烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
遺傳性前列腺癌蛋白2抗體9β-Hydroxydarutigenol別名: 分子式: C20H34O4性狀: Powder純度: 96.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 豨薟;海松烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
磷化絲裂原活化蛋白激酶1抗體Kirenol別名: 分子式: C20H34O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 抗炎;鎮(zhèn)痛活性;豨薟屬;海松烷;中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
磷化絲裂原活化蛋白激酶1抗體ent-kaurane-17,19-dioic acid別名: 分子式: C20H30O4性狀: Cryst.純度: 特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 澤蘭屬;貝殼杉烷;中藥對照品;中藥標準品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準