ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱 | 穿孔蛋白1ELISA試劑盒免費(fèi)包郵 |
英文名稱 | Perforin 1 |
貨號(hào) | FS-P65116 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
原癌蛋白CBL2抗體產(chǎn)品別名:小鼠D-二聚體(D2D)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià)，3,5-二-L-酪氨 DI-IODO-L-TYROSINE(P)
信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α抗體產(chǎn)品別名:小鼠D-多巴色素變位酶(DDT)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià)，3,5-二-L-酪氨 DI-IODO-L-TYROSINE(P)
信號(hào)淋巴活化分子CD150抗體產(chǎn)品別名:小鼠DNA修復(fù)蛋白R(shí)AD50(RAD50)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià)，3,3'-二吲哚 DI-INDOLYLMETHANE, 3,3'-(RG)
巨噬炎性蛋白16抗體產(chǎn)品別名:小鼠DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子3(DDIT3)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià)，3,3'-二吲哚 DI-INDOLYLMETHANE, 3,3'-(RG)
果蠅CG6856-PA抗體產(chǎn)品別名:小鼠DNA酶Ⅰ樣蛋白3(DNASE1L3)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià)，DIIODO-L-THYRONINE, 3,3'-(RG)(REQUEST QUOTE)
色素c氧化酶COX7A2抗體產(chǎn)品別名:小鼠DNA甲轉(zhuǎn)移酶3B(DNMT3B)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià)，3,5-二甲腺氨 DIIODO-L-THYRONINE, 3,5-(RG)(REQUEST QUOTE)
剪切和多聚腺苷化特異性因子4抗體產(chǎn)品別名:小鼠DNA甲轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià)，3,5-二甲腺氨 DIIODO-L-THYRONINE, 3,5-(P)
組織蛋白酶E抗體產(chǎn)品別名:小鼠DNA激活蛋白激酶催化亞肽(PRKDC)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià)，DIIODO-L-THYRONINE, 3,3'-(P)
緊密連接蛋白5抗體產(chǎn)品別名:小鼠Discs大同源物4(DLG4)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià)，2,3-二甲氧-2'-羥查耳酮 DIMETHOXY-2'-HYDROXYCHALCONE, 2,3-(RG)
分化周期CDC42相互作用蛋白4抗體產(chǎn)品別名:小鼠Discoidin域受體家族成員1(DDR1)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià)，2,6-二甲氧對(duì)苯二酚 DIMETHOXYHYDROQUINONE, 2,6-(RG)(PLEASE CALL)
周期蛋白依賴性激酶樣3抗體產(chǎn)品別名:小鼠Dickkopf相關(guān)蛋白4(DKK4)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià)，5,7-二甲氧木犀草啶 DIMETHOXYLUTEOLINIDIN, 5,7-(SH)
殺菌肽/天蠶抗菌肽單克隆抗體產(chǎn)品別名:小鼠Dickkopf相關(guān)蛋白1(DKK1)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià)，5,7-二甲氧木犀草啶 DIMETHOXYLUTEOLINIDIN, 5,7-(SH)
第十七號(hào)染色體開放閱讀框87抗體產(chǎn)品別名:小鼠C組著色性干皮病偶聯(lián)因子(XPC)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià)，DIMETHOXYHYDROQUINONE, 2,3-(RG)(PLEASE CALL)
降鈣素受體抗體產(chǎn)品別名:小鼠C-型鈉尿肽(P)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià)，NOR-9-CARBOXY-DELTA 9 THC, (+/-)-11-(SH)(PLEASE CALL)
補(bǔ)體C2a鏈多肽抗體產(chǎn)品別名:小鼠C-肽(C-Peptide)ELISA試劑盒批發(fā)價(jià)，7,8-二甲氧黃酮 DIMETHOXYFLAVONE, 7,8-(RG)
穿孔蛋白1ELISA試劑盒免費(fèi)包郵Human ENPP5 ELISA KitpACYC184規(guī)格: 1ml甘油管1支，20ul質(zhì)粒，一般次日下午
Human ELP4 ELISA Kit黃桿菌拉丁屬名: Flavobacterium panaciterrae
Human EIF5A2(Eukaryotic translation initiation factor 5A-2) ELISA Kit四川散斑殼注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用
Human EIF5B ELISA Kit繩索狀芽胞桿菌用途: Conversion of steroid hormones (U.S. Pats. 3,053,832; 3,054,811)
Human EMB ELISA Kit膠孢用途: 植物病原菌。
Human EIF6(Eukaryotic Translation Initiation Factor 6) ELISA Kit枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
Human ELMOD1 ELISA Kit釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Human ELMOD2 ELISA Kit枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
Human EIF5A(Eukaryotic translation initiation factor 5A-1) ELISA Kit熱帶假絲酵母拉丁屬名: Candida tropicalis
Human EIF5 ELISA Kit溜曲霉拉丁屬名: Aspergillus tamarii
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
