ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | CIC人循環(huán)免疫復(fù)合物ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human circulating immune complex, CIC Elisa Kit |
貨號 | FS-H64248 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
豬胃腸炎病核檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:>98%,BR Daidzein
犬瘟熱病核檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:>99%,BR D(-)-allo-Threonine
犬細(xì)病核檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:>98.5%,BR Deoxycorticosterone acetate
西尼羅病核檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Deoxycorticosterone acetate
沙門氏菌核檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:>99% Tetrahydro-L-Biopterin (dihydrochloride)
腸出血性大腸桿菌O157核檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:>98% Ambrisentan
單增李斯特菌核檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ambrisentan
副溶血弧菌核檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:>99%,鹽鹽 Dronedarone HCL
賈第鞭毛蟲核檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Dronedarone
隱孢子蟲核檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:>99%,BR Ranolazine HCl
管圓線蟲核檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ranolazine HCl
華支睪吸蟲核檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:>99% Lercanidipine HCl
賈第鞭毛蟲和隱孢子蟲二重核檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Lercanidipine HCl
金黃色葡萄球菌核檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:>98%,進(jìn)分 Promethazine Hydrochloride
志賀氏菌核檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 規(guī)格:>99%,II晶型 Agomelatine
LasiodiplodinDMT保護(hù)性-2'-甲氧基尿苷 分子式:C18H14O3 性狀:Red powder 純度:98.5%
3',4'-Dihydroxyacetophenone5’-DMT-2’-TBDMS-Bz-rC 分子式:C19H18O4 性狀:Red powder 純度:97.0%
Altholactone5’-DMT-2’-TBDMS-rU 分子式:C18H12O3 性狀:Red powder 純度:96.0%
Goniodiol 8-acetate5’-DMT-2’-TBDMS-iBu-rG 分子式:C36H28O6 性狀:Red powder 純度:98.5%
Goniodiol 7-acetate5’-DMT-2’-TBDMS-Ac-rC 分子式:C19H20O3 性狀:Red cryst. 純度:98.0%
Wittifuran X5’-DMT-2’-TBDMS-Bz-rA 分子式:C18H14O3 性狀:Red powder 純度:98.0%
4-Hydroxyphenylacetic acidDMT保護(hù)性脫氧肌苷 分子式:C8H8O4 性狀:Yellow powder 純度:98.0%
3-DeoxyzinnolideN-乙?;?5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)-2'-脫氧胞苷 分子式:C19H18O3 性狀:Red powder 純度:98.5%
1,7-Bis(4-hydroxyphenyl)hept-6-en-3-ol保護(hù)胸甙(DMT-T) 分子式:C11H14O5 性狀:Yellow powder 純度:%
整合素αM(ITGαM)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: ITGαM ELISA Kit
Mouse Clara cell protein (CC16) ELISA Kit 克拉拉蛋白(CC16)酶聯(lián)免疫試劑盒
MouseIerleukin12,IL-12/P70ELISAKIT 白介素12(IL-12/P70)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit糖化血紅蛋白A1c規(guī)格:48T/96T
無去垢劑裂解液用于物理裂解
ELISAKitTG狀腺球蛋白規(guī)格:48T/96T
16α羥基雌1(16-α OHE-1)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊生長激素釋放多肽(GHRP)酶聯(lián)免疫試劑盒 Goat Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit
尿17羥皮質(zhì)類固(17-OHCS)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: 17-OHCS ELISA Kit
RabbitThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFI酶聯(lián)免疫試劑盒兔纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanBeta-naphthol,β-Nph酶聯(lián)免疫試劑盒β萘酚(β-Nph)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanCX3C-chemokinereceptor1,CX3CR1ELISAKitCX3C趨化因子受體1(CX3CR1)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
CIC人循環(huán)免疫復(fù)合物ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理豬瘟病抗體3-甲氧基苯肼鹽鹽Porcine ABCG1 (ATP Binding Cassette Transporter G1) ELISA Kit
豬瘟病抗體3-甲氧基苯肼鹽鹽Porcine GUSβ (β-glucuronidase) ELISA Kit
嗜鉻粒蛋白C抗體1-Boc-3-(甲氨基)Porcine PKP1 (Plakophilin 1) ELISA Kit
煙型乙酰膽受體α10/AChRα10抗體1-Boc-3-(甲氨基)Porcine GP-73 (Golgi Protein 73) ELISA Kit
煙型乙酰膽受體α6/AChRα6抗體1-Boc-3-(甲氨基)Porcine CHD3 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 3) ELISA Kit
煙型乙酰膽受體α9/AChRα9抗體(-)-10-樟腦磺酰Porcine ITLN1 (Inectin 1/Omentin) ELISA Kit
煙型乙酰膽受體δ/AChRδ抗體(-)-10-樟腦磺酰Porcine SDF-1/CXCL12 (Stromal Cell Derived Factor 1) ELISA Kit
凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體(-)-10-樟腦磺酰Porcine ERN1 (Endoplasmic Reticulum to Nucleus Signalling 1) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)