ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作，必能得出準確的實驗結(jié)果，可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱 | SOD人超氧化物歧化酶ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Super Oxidase Dimutase, SOD Elisa Kit |
貨號 | FS-H63947 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿，細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
泊洛沙姆188有效期: 2年溶解性: 100mg/ml in War別名: 聚醚英文名稱: Polyethylene-polypropylene glycol188
k-卡拉膠有效期: 3年級別: BR溶解性: 10mg/mL in war別名: 卡拉膠類型III Κ-角叉菜聚糖 角叉萊膠
丹磺酰有效期: 3年溶解性: 20mg/ml CHCL3別名: 丹磺酰 1-二甲氨基萘-5-磺酰英文名稱: Dansyl Chloride
大黃素有效期: 2年溶解性: 5mg/ml EtOH別名: 朱砂蓮甲素英文名稱: Emodin
辣椒紅有效期: 3年別名: 辣椒紅素英文名稱: Capsanthin: 465-42-9
阿斯巴甜有效期: 3年溶解性: 80mg/mL War 別名: L-天冬氨酰-L-丙氨甲酯英文名稱: Aspartame
二水槲皮素有效期: 2年級別: 醫(yī)藥級溶解性: 10 mg/mL EtOH別名: 二水櫟精; 二水槲皮黃素; 櫟精二水合物
齊墩果別名: 土當歸英文名稱: Oleanolic acid: 508-02-1分子式: C30H48O3
SOD人超氧化物歧化酶ELISA試劑盒實驗原理CD19/FITC 熒光素標記CD19抗體IgG微管蛋白β輔助因子D抗體2,4-二-5-嘧Mouse PLA2G2D (Phospholipase A2, Group IID) ELISA Kit
Phospho-CD19 (Tyr531) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、鼠磷化CD19抗體IgG鈣粘蛋白相關(guān)蛋白受體BTR1抗體2,4-二-5-嘧Mouse cPLA2 (Phospholipase A2, Cytosolic) ELISA Kit
CD19/PE 熒光素PE標記CD19抗體IgG有絲分裂蛋白BUB3抗體2,4-二-5-嘧Mouse iPLA2 (Phospholipase A2, Calcium Independent ) ELISA Kit
CD20/FITC 熒光素標記CD20抗體IgGp60TRP蛋白抗體2-聯(lián)苯Mouse SAA2 (Serum Amyloid A2) ELISA Kit
CD20/Biotin 生物素化CD20抗體IgG博萊霉素水解酶抗體2-聯(lián)苯Mouse RTN4 (Reticulon 4) ELISA Kit
CD20/MS4A1/PE 熒光素PE標記CD20抗體IgG短蛋白聚糖抗體5-溴-2--3-甲基吡Mouse ACCPA (anti-cyclic citrullinated peptide antibody) ELISA Kit
CD25/IL-2RA /PE-Cy5 熒光素PE-Cy5標記兔抗人、大、鼠白介素2受體a鏈抗體IgGBTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體5-溴-2--3-甲基吡Mouse βMSH (beta-Melanocyte Stimulating Hormone) ELISA Kit
CD22/FITC 熒光素標記抗白分化抗原CD22抗體IgG巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白12抗體3-巰基甲酯Mouse Ta1 (Thymosin-α1) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
