ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱 | IgG人免疫球蛋白GELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Immunoglobulin G, IgG Elisa Kit |
貨號 | FS-H64279 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
腫瘤/抗原26抗體英文全稱Argininosuccinate Synthetase 1英文簡稱ASS1 檢測范圍:3044nmol/L-400U/L
腫瘤/抗原20抗體英文全稱ELOVL5英文簡稱ELOVL5 檢測范圍:8806nmol/L-80ng/mL
腫瘤/抗原2.4抗體英文全稱CA153英文簡稱CA153 檢測范圍:1115nmol/L-240U/ml
腫瘤/抗原2.3抗體英文全稱β-microglobulin英文簡稱β-MG 檢測范圍:1114nmol/L-10μg/ml
腫瘤/抗原2.2抗體英文全稱Soluble cytokine receptor英文簡稱sCKR 檢測范圍:1113nmol/L-2000pg/ml
腫瘤/抗原1B英文全稱extractable nuclear antigen英文簡稱Extractable ANA 檢測范圍:1652nmol/L-
腫瘤/抗原1B/1A英文全稱outer membrane protein A英文簡稱OmpA 檢測范圍:2130nmol/L-5000pg/mL
腫瘤/抗原13抗體英文全稱cancer antigen 27-29英文簡稱CA27-29 檢測范圍:3049nmol/L-100U/mL
Leflunomide 規(guī)格：>98.5%,USP31,BR 腦特異性血管生成抑制蛋白1抗體
Leflunomide 規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Bcl2相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體
LevofloxacinHemihidrated 規(guī)格：>98.5%,USP34,BR,可用于培養(yǎng) BCL2樣15促凋亡蛋白抗體
LevofloxacinHemihidrated 規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 BCL2相關(guān)X蛋白抗體
Lornoxicam 規(guī)格：>99% Bcl2樣凋亡蛋白9抗體
Lornoxicam 規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Bcl2樣凋亡蛋白13抗體
LosartanPotassium 規(guī)格：>99%,USP,BR,可用于培養(yǎng) Bcl2樣凋亡蛋白14抗體
LosartanPotassium 規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Bcl2蛋白修飾因子抗體
Masitinib 規(guī)格：>98% 骨形態(tài)發(fā)生蛋白11抗體
脂肪甘油三酯酯酶(ATGL)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)酶聯(lián)免疫試劑盒 Human Angiotensin Ⅱ Receptor 2 aibody,AT2R-Ab ELISA Kit
抗斑疹傷寒抗體(ai-typhus-Ab)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： ai-typhus-Ab ELISA Kit
Ratisletcellaibody,ICA酶聯(lián)免疫試劑盒胰島抗體(ICA)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumanGlycogenphosphorylaseMM,GP-MM酶聯(lián)免疫試劑盒糖原化酶同工酶MM(GP-MM)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumanKallikrein10,KLK10ELISAKit激肽釋放酶10(KLK10)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
犬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊過氧化氫酶(CAT)酶聯(lián)免疫試劑盒 Goat Catalase,CAT ELISA kit
內(nèi)皮素1(ET-1)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： ET-1 ELISA Kit
Rabbitβ-Thromboglobulin,β-TG酶聯(lián)免疫試劑盒β血板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumanBromodeoxyuridine,BrdU酶聯(lián)免疫試劑盒溴脫氧核苷尿嘧(BrdU)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21BELISAKit色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
IgG人免疫球蛋白GELISA試劑盒實驗原理磷化周期檢測點激酶2抗體10-(1-萘基)蒽-9-Porcine PCPE1 (Procollagen C Proteinase Enhancer 1 ) ELISA Kit
磷化周期檢測點激酶2抗體2,4-二-5-硝基苯Porcine CA153 (Carbohydrate Antigen 153) ELISA Kit
磷化周期檢測點激酶2抗體2,4-二-5-硝基苯Porcine PRSS8 (Protease, Serine 8) ELISA Kit
遺傳性脈絡(luò)膜缺乏癥相關(guān)蛋白抗體4-溴-3-(基)苯甲Porcine PDK4 (Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit
遺傳性脈絡(luò)膜缺乏癥相關(guān)蛋白樣抗體4-溴-3-(基)苯甲Porcine BCAN (Brevican) ELISA Kit
腺癌標(biāo)志物CHMP2A抗體5-硝基-8-羥基喹啉Porcine TM (Thrombin) ELISA Kit
染色質(zhì)修飾蛋白CHMP6抗體5-硝基-8-羥基喹啉Porcine PACAPR (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide Receptor 1) ELISA Kit
染色質(zhì)修飾蛋白CHMP5抗體5-硝基-8-羥基喹啉Porcine KLK6 (Kallikrein 6) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
