ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務!
產(chǎn)品名稱 | TR人凝血酶受體ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human thrombin receptor, TR Elisa Kit |
貨號 | FS-H64271 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
三羥基基輔酶A合成酶2抗體英文全稱nectin-4英文簡稱nectin-4 檢測范圍:4978nmol/L-240pg/mL
三羥基基輔酶A合成酶1英文全稱β-hexosaminidase英文簡稱β-Hex 檢測范圍:4995nmol/L-48U/L
三羥基基輔酶A還原酶抗體英文全稱IL-18BP英文簡稱IL-18BP 檢測范圍:5003nmol/L-200pg/mL
三磷腺檸檬裂解酶抗體英文全稱macrophage-stimulating proteinα英文簡稱MSP-α 檢測范圍:351nmol/L-1600pg/mL
三磷腺苷依賴解旋酶ddx5抗體英文全稱strigolactones英文簡稱SLs 檢測范圍:3110nmol/L-120ng/mL
三磷腺苷依賴解旋酶DDX3抗體英文全稱High Mobility Group AT Hook Protein 2英文簡稱HMGA2 檢測范圍:2924nmol/L-20ng/mL
三磷腺苷依賴解旋酶DDX23抗體英文全稱Lyme Antibody英文簡稱Lyme Ab 檢測范圍:2922nmol/L-
三磷腺苷受體受體P2X3抗體英文全稱tartrate-resistant acid phosphatase英文簡稱TRAP 檢測范圍:7342nmol/L-40mIU/ml
L-Cystinehydrochloride 規(guī)格:>98%,BR 雌激素轉(zhuǎn)移酶抗體
L-Cysteine 規(guī)格:含量98~101%,BR E Tag標簽抗體
L-Cysteine 規(guī)格:>98%,標準品 內(nèi)皮受體蛋白酪氨激酶抗體
L-Cysteinehydrochloridemonohydrate 規(guī)格:>99%,BR 酪氨蛋白激酶受體B2抗體
DL-Cysteine 規(guī)格:>97%,易氧化 轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體
L-Histidine 規(guī)格:>99%,BR 雌激素受體α抗體(用于western blot)
L-Alanine 規(guī)格:>99%,BR ENPP3抗體IgG
L-Tyrosine 規(guī)格:>99%,BR 登革熱病包膜糖蛋白E抗體
L-Tyrosine 規(guī)格:>98%,標準品 食道癌相關(guān)基因抗體
脂蛋白脂酶(LPL)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: LPL ELISA Kit
胰島抗體(ICA)ELISA檢測試劑盒Humanisletcellaibody,ICAELISAKit 96T/48T
半胱氨蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rat Cystatin C,Cys-C ELISA Kit
CLIAKitfoIEG1(HumaGF-beta-inducibleearlyresponsegene-1)ELISAKitTGF-β誘導早期基因1規(guī)格:48T/96T
全組織衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒10次
ELISAKitAOAb抗卵巢抗體規(guī)格:48T/96T
犬孕激素/孕(PROG)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊(Coisone)酶聯(lián)免疫試劑盒 Goat Coisone ELISA Kit
內(nèi)皮抑素(ES)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: ES ELISA Kit
rabbitTumornecrosisfactorα,TNFα酶聯(lián)免疫試劑盒壞死因子α(TNF-α)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanbonesialoprotein,BSP酶聯(lián)免疫試劑盒骨涎蛋白(BSP)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humancyclooxygenase-2,COX-2ELISAKit環(huán)加氧酶2(COX-2)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
TR人凝血酶受體ELISA試劑盒實驗原理C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體2,4-二甲氧基苯甲酰Porcine TNKS2 (Tankyrase 2) ELISA Kit
γ干擾素誘導單核因子抗體2,4-二甲氧基苯甲酰Porcine NPYR2 (Neuropeptide Y Receptor Y2) ELISA Kit
血板因子4抗體吲哚-4-甲甲酯Porcine CDK4 (Cyclin Dependent Kinase 4) ELISA Kit
血板趨化因子7蛋白抗體吲哚-4-甲甲酯Porcine NNE (Non-Neuronal Enolase) ELISA Kit
干擾素誘導T趨化因子抗體吲哚-4-甲甲酯Porcine COMP (Cartilage Oligomeric Matrix Protein) ELISA Kit
B-淋巴趨化因子抗體N,N-二甲基磺酰胺Porcine BAK1 (Bcl2 Antagonist/Killer 1) ELISA Kit
凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體N,N-二甲基磺酰胺Porcine PGF (Placental Growth Factor) ELISA Kit
凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白14抗體1-Boc-3-氮雜環(huán)丁Porcine SEPP1 (Selenoprotein P) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準