商品介紹:
測(cè)定意義 β-GD廣泛存在于動(dòng)物組織中,是一種參與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程的基質(zhì)降解酶,具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。該酶在肝細(xì)胞中含量較高。此外在胃癌組織中含量豐富,測(cè)定胃液β-GD活性對(duì)于研究胃癌具有重要的意義。 測(cè)定原理 β-GD催化苯 β-D-葡萄糖醛酸產(chǎn)生游離的苯,通過(guò)測(cè)定苯含量反應(yīng)該酶活性高低。 需自備的儀器和用品 可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過(guò)產(chǎn)品,售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠(chéng)為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱(chēng):βGDβ葡萄糖醛酸苷酶檢測(cè)試劑盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
檢測(cè)方法:微量法
貨號(hào):FS-01S63643
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。 |
粗酶液提取:
1、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。 |
胱天蛋白1(P1)試劑盒Human MARVELD2 ELISA Kit載脂蛋白E4抗體
半胱天冬3(P3)試劑盒Human C1orf31(Cytochrome c oxidase assembly factor 6 homolog) ELISA Kit自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體
組織蛋白B(CTSB)試劑盒Human C10orf58(Redox-regulatory protein FAM213A) ELISA Kit磷化自噬相關(guān)蛋白4C抗體
組織蛋白V(CTSV)試劑盒Human NY-ESO-1(Cancer/testis antigen 1) ELISA Kit磷化自噬相關(guān)蛋白4C抗體
單核趨化蛋白1(MCP-1)試劑盒Human Caspase 12 ELISA Kit磷化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體
巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α)試劑盒Human CD320 ELISA Kit磷化失調(diào)癥蛋白1抗體
巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β)試劑盒 Human TMPRSS15(Enteropeptidase) ELISA Kit脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體
調(diào)節(jié)正常T表達(dá)和分泌因子(RANTES)試劑盒 Human SPAST(Spastin) ELISA Kit磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體
單核趨化蛋白3(MCP-3)試劑盒Human TOM20(translocase of outer mitochondrial membrane 20 homolog) ELISA Kit磷化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體
嗜粒趨化因子(ECF/CCL11)試劑盒Human MLKL(mixed lineage kinase domain-like) ELISA Kit磷化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體
胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)試劑盒Human HSD3B7(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 7) ELISA Kit磷化活化復(fù)制因子2抗體
巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α)試劑盒Human MVK(Mevalonate kinase) ELISA Kit磷化鈉ATP蛋白a1抗體
二級(jí)組織趨化因子(SLC)試劑盒Human CRTC2(CREB-regulated transcription coactivator 2) ELISA Kit磷化鈉ATP蛋白a1抗體
巨噬來(lái)源的趨化因子(MDC)試劑盒Human total SOD(superoxide dismutase) ELISA Kit乙酰A羧化抗體
髓樣前體抑制因子2(MPIF2)試劑盒Human CD97(CD97 antigen) ELISA Kit磷化乙酰A羧化抗體
βGDβ葡萄糖醛酸苷酶檢測(cè)試劑盒微量法胰高血糖樣肽-2(多肽抗原)Anti-ATRIP Antibody龍脷葉Long Liye
94kDa 糖調(diào)節(jié)蛋白(抗原)Anti-ATRX Antibody淡豆豉Semen sojae praeparatum
膜粘連蛋白 A抗原Anti-ATXN2L Antibody桃枝Peach branches
G蛋白(鳥(niǎo)苷結(jié)合蛋白)(抗原)Anti-AWAT1 Antibody榼藤子仁To Kohito
糖皮質(zhì)受體 多肽Anti-ATXN7L1 Antibody藕節(jié)Nodus Nelumbinis Rhizomatis
膜粘連蛋白-2抗原Anti-AVPR2 Antibody漢桃葉Han?peach
G蛋白偶聯(lián)受體-2(抗原)Anti-AVEN Antibody蕓香草Lemongrass
三磷鳥(niǎo)苷環(huán)水解(抗原)Anti-B3GALT2 Antibody九里香(千里香)Murraya paniculata?(Trinidad)