公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過產(chǎn)品,售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠(chéng)為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱:TrxR硫氧還蛋白氧化還原酶檢測(cè)試劑盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
檢測(cè)方法:微量法
貨號(hào):FS-01S63258
商品介紹:
測(cè)定意義 TrxR是一種NADPH依賴的包含F(xiàn)AD結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶,屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員,與硫氧還蛋白以及NADPH共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng)。TrxR與GR活性類似,催化GSSG還原生成GSH,是谷胱甘氧化還原循環(huán)關(guān)鍵酶之一。 測(cè)定原理: TrxR催化NADPH還原DTNB生成TNB和NADP+,TNB在412 nm有特征吸收峰,通過測(cè)定412nm波長(zhǎng)處TNB的增加速率,即可計(jì)算TrxR活性。 自備儀器和用品: 低溫離心機(jī)、可調(diào)節(jié)移液器、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
1、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。 |
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。 |
粘蛋白5AC(MUC5AC)檢測(cè)試劑盒紅菇屬*Guinea pig TFF2 (Trefoil Factor 2) ELISA Kit
8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)檢測(cè)試劑盒黃色籃狀Guinea pig GCP-2 (Granulocyte Chemotactic Protein 2) ELISA Kit
胞漿型磷脂A2(cPLA2)檢測(cè)試劑盒微紫青霉Guinea pig LN (Laminin) ELISA Kit
褪黑(MT)檢測(cè)試劑盒枯草芽孢桿Guinea pig TXLNb (Taxilin Beta) ELISA Kit
Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)檢測(cè)試劑盒擬青霉Guinea pig CLA/CTAGE (Cutaneous Lymphocyte Associated Antigen) ELISA Kit
葡萄糖激(GCK)檢測(cè)試劑盒硬水土地桿Guinea pig gp130 (Glucoprotein 130) ELISA Kit
歸巢關(guān)聯(lián)黏附分子(HCAM)檢測(cè)試劑盒枯草芽孢桿Guinea pig TPPP (Tubulin Polymerization Promoting Protein) ELISA Kit
淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)檢測(cè)試劑盒大腸埃希氏Guinea pig DPP10 (Dipeptidyl Peptidase X) ELISA Kit
淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)檢測(cè)試劑盒宋氏志賀氏Guinea pig IGFBP-4 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4) ELISA Kit
淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)檢測(cè)試劑盒泡囊側(cè)耳(鮑魚菇)Guinea pig AP 13 (Apelin 13) ELISA Kit
胸腺嘧核苷磷化(TP)檢測(cè)試劑盒白阿魏菇Guinea pig S100B (S100 Calcium Binding Protein B) ELISA Kit
Slit同源物2(Slit2)檢測(cè)試劑盒大腸埃希氏Guinea pig GATA3 (GATA Binding Protein 3) ELISA Kit
Slit同源物2(Slit2)檢測(cè)試劑盒土曲霉原變種Guinea pig TIMP-3 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 3) ELISA Kit
粘蛋白5AC(MUC5AC)檢測(cè)試劑盒鏈格孢Guinea pig PTH (Parathyroid Hormone) ELISA Kit
載脂蛋白A2(APOA2)檢測(cè)試劑盒金針菇Guinea pig SEP1 (Selenoprotein 1) ELISA Kit
TrxR硫氧還蛋白氧化還原酶檢測(cè)試劑盒微量法小鼠抗血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A抗體Anti-MAOA Antibody(原貨號(hào)PB0704)考馬斯亮藍(lán) R-250 染液250mL規(guī)格
粘著斑蛋白抗體Anti-MAP2 Antibody支氣管上皮生長(zhǎng)因子5mL價(jià)格
嗜鉻顆粒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白VAT1抗體Anti-MAOB Antibody(原貨號(hào)PB0705)間充質(zhì)干生長(zhǎng)因子 - 無(wú)血淸5mL規(guī)格
D結(jié)合蛋白抗體Anti-MAP1LC3A Antibody親和層析柱3 mL規(guī)格
血管非炎癥分子1抗體Anti-MAP2K2 AntibodyCHAPS5g規(guī)格
血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體Anti-MAP2K1 Antibody長(zhǎng)效期 SDS-PAGE 配膠液200mL圖片
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C型抗體Anti-MAP2K3 Antibody肝生長(zhǎng)因子5mL價(jià)格
囊泡相關(guān)膜蛋白3抗體Anti-MAP2K3 Antibody平滑肌生長(zhǎng)因子 ( 不含血清 )5mL規(guī)格