產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/96樣 | 微量法 | FS-01S63284 |
商品介紹:
測(cè)定意義 APX是植物清除活性氧的重要抗氧化酶之一,也是抗壞血酸代謝的關(guān)鍵酶之一。APX具有多種同功酶,分別定位于葉綠體、胞質(zhì)、線粒體、過氧化物和乙醛酸體,以及過氧化體和類囊體膜上。APX 催化H2O2氧化AsA,是植 AsA 的主要消耗者。APX的活性直接影響到AsA的含量,APX與AsA具有一定的負(fù)相關(guān)性。 測(cè)定原理: APX 催化催化H2O2氧化AsA,通過測(cè)定AsA氧化速率,來計(jì)算得APX活性。 自備儀器用品: 低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、移液槍、研缽、冰和蒸餾水。 |
樣本前處理步驟:
樣本處理前須知
處理任何樣本時(shí),都必須注意:
(1) 實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭(2)實(shí)驗(yàn)前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈,必要時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn) 行清潔,避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(a)組織樣品處理方法: 1、 稱取5±0.05g組織樣品于50ml離心管中,先加入3ml已稀釋好的樣品提取液震蕩2min;再加入10ml乙腈,充分震蕩5min, 2、 加入2g中性氧化鋁;震蕩2min ,室溫4000r/min以上,離心10min;; 3、 取6ml上清液于干凈離心管中,加入5ml二氯甲烷震蕩3min ,室溫4000r/min以上,離心10min;; 4、 取下層清澈液體于玻璃管中,加入20ul氧化劑混勻,在56℃條件下氮?dú)饣蚩諝饬鞔抵?干燥; 5、 加入1ml復(fù)溶液,充分溶解干燥殘留物。 6、 取100ul 上清液與100ul 已稀釋好的復(fù)溶液充分混合30s, 7、 取50ul進(jìn)行分析。 樣本稀釋倍數(shù): 1倍 | (b)水樣品處理方法: 1、取50ul 上清液與450ul 已稀釋好的復(fù)溶液充分混合30s, 2、取50ul進(jìn)行分析。 樣本稀釋倍數(shù):10倍
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下列是公司正在出售的產(chǎn)品:
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實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
2、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
3、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
4、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
5、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。
6、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
8、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。
10、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。