ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果，可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱 | NOS人一氧化氮合成酶ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human nitric oxide synthase, NOS Elisa Kit |
貨號 | FS-H63960 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
NAV3 Polyclonal Antibody 神經(jīng)元引導(dǎo)蛋白3抗體
ACHB4 Polyclonal Antibody 神經(jīng)元酰膽受體亞基B4抗體
ACHB3 Polyclonal Antibody 神經(jīng)元酰膽受體亞基B3抗體
ACHA6 Polyclonal Antibody 神經(jīng)元酰膽受體亞基A6抗體
ACHA4 Polyclonal Antibody 神經(jīng)元酰膽受體亞基A4抗體
NSE Monoclonal Antibody 神經(jīng)元特異性醇酶 單克隆抗體
CALY Polyclonal Antibody 神經(jīng)元特異性囊泡蛋白calcyon抗體
MDGA1 Polyclonal Antibody 神經(jīng)元膜糖蛋白錨定蛋白1抗體
NAIP Polyclonal Antibody 神經(jīng)元凋亡抑制蛋白NAIP抗體
NT3 Polyclonal Antibody 神經(jīng)營養(yǎng)蛋白3抗體
ETFA 電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白α抗體 * 0.2ml Alarelin Acetate
γtaxilin/LSR5 脂多糖相關(guān)反應(yīng)蛋白5抗體 * 0.2ml Alendronate Sodium
T4/LThyroxine 甲狀腺素T4抗體 * 0.2ml Alendronate Sodium
HLA G(NTerminus) 人類白抗原G抗體（N端） * 0.1ml Allopurinol
HLA G(Cterminal) 人類白抗原G抗體（C端） * 0.1ml Allopurinol
hemagglutinin protein/H 麻疹病血凝素抗體 * 0.2ml Allylestrenol
WIG1/PAG608 野生型P53誘導(dǎo)基因1抗體 * 0.1ml Allylestrenol
CD71/TFR/Transferrin receptor 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體 * 0.1ml Alprostadil,PGE1,
血板因子3(PF-3)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： PF-3 ELISA Kit
封閉抗體(BA)ELISA檢測試劑盒HumanBlockingaibody,BAELISAKit 96T/48T
Smad1 酶聯(lián)免疫試劑盒 Rat Mothers against decapeaplegic homolog 1 ELISA Kit
CLIAKitforsPLA2(HumansecretedphospholipaseA2)ELISAKit分泌型脂酶A2規(guī)格：48T/96T
肉類含量克爾道(Kjeldahl)法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitMCF巨噬趨化因子規(guī)格：48T/96T
β內(nèi)酰酶抑制劑(BLI)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
谷胱甘肽還原酶(GR)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit Glathione Reductase,GR ELISA Kit
殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： BPI ELISA Kit
Porcinemyelinbasicprotein,MBP酶聯(lián)免疫試劑盒髓脂性蛋白(MBP)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumanAmylin酶聯(lián)免疫試劑盒胰淀素(Amylin)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
Humanarachidonate5-lipoxygenase,ALOX-5ELISAKit花生四烯5脂加氧酶(ALOX-5)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
NOS人一氧化氮合成酶ELISA試劑盒實驗原理nectin 2/CD112/FITC 熒光素標(biāo)記黏附分子CD112抗體IgG生物素酶抗體鹽侖西平Mouse IAPP (Islet Amyloid Polypeptide) ELISA Kit
CD117/FITC 熒光素標(biāo)記CD117抗體IgGBax相互作用因子1抗體鹽侖西平Mouse ANGPTL3 (Angiopoietin Like Protein 3) ELISA Kit
CD133 gen/FITC 熒光素標(biāo)記造血干抗原CD133抗體IgG表皮生長因子反應(yīng)蛋白2抗體2-基-3,5-二吡Mouse FETUA (Fetuin A) ELISA Kit
OX40/CD134/TNFRSF4/FITC 熒光素標(biāo)記CD134抗體IgGBCL2相關(guān)X蛋白抗體化壬丁基磺酰Mouse SDC1 (Syndecan 1) ELISA Kit
IL-7Ra/CD127/PE 熒光素PE標(biāo)記兔抗人、大、鼠、馬、兔白介素-7受體a抗體IgGBcl2樣凋亡蛋白13抗體雙（三環(huán)己基膦）二化鈀Mouse IGFBP5 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5) ELISA Kit
CD137/TNFRSF9/FITC 熒光素標(biāo)記CD137抗體IgGBcl2樣凋亡蛋白14抗體雙（三環(huán)己基膦）二化鈀Mouse ApoA2 (Apolipoprotein A2) ELISA Kit
CD133 antigen/PE 熒光素藻紅蛋白標(biāo)記兔抗人、大、鼠和果蠅CD133抗體IgGBcl2蛋白修飾因子抗體雙（三環(huán)己基膦）二化鈀Mouse ApoC3 (Apolipoprotein C3) ELISA Kit
HVEM/TNFRSF14/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子受體超家族成員14抗體IgG骨形態(tài)發(fā)生蛋白11抗體四氫吡喃Mouse CYP2E1 (Cytochrome P450, family 2, subfamily E, polypeptide 1) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
