樣品收集、處理及保存方法
1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。?
產品名:硝基酪氨酸(NT)檢測試劑盒
英文名:NT ELISA Kit
貨號:FS-E64389
硝基酪氨酸(NT)檢測試劑盒 英文名稱:NT ELISA Kit 產品別名:小鼠硝基酪氨酸(NT)ELISA試劑盒批發(fā)價,小鼠硝基酪氨酸(NT)ELISA試劑盒廠價用于測定血清,血漿及相關液體等樣本,例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本
服務:可提供免費代測服務,以及產品說明書和技術指導等
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等
保存環(huán)境:2-8℃低溫、避光、防潮
產品優(yōu)勢:ELISA試劑為我司主營產品之一,產品皆嚴格按照相關標準進行,并經過了嚴格地反復地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產品的質量,從而保證您的實驗順利進行。產品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務。
試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
注意事項
1)試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2)實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
3)不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7)底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9)按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
Aerococcusurinae 中文名稱:脲氣球菌Aerococcusurinae分離基物:人類的尿路感染,丹麥安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:58生長條件:30℃,厭氧 純度:98%
StachybotrysatraCorda 中文名稱:黑色葡萄穗霉StachybotrysatraCorda分離基物:羊糞安全等級:1模式菌株:no應用領域:分解纖維素培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:17生長條件:25~28℃ 純度:97%
Amycolatopsisthermoflav 中文名稱:熱黃擬無枝菌Amycolatopsisthermoflav安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:158生長條件:45℃ 純度:97%
Amycolatopsisalbidoflavus 中文名稱:AmycolatopsisalbidoflavusAmycolatopsisalbidoflavus分離基物:土壤安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:158生長條件:28℃ 純度:97%
Streptomycesmegasporus 中文名稱:巨孢鏈霉菌Streptomycesmegasporus分離基物:土壤安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:158生長條件:37℃ 純度:98%
Streptomyceslydicus 中文名稱:利迪鏈霉菌Streptomyceslydicus分離基物:土壤安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:。產生利迪鏈菌素、利迪霉素和阿克唑培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:70生長條件:28℃ 純度:98%
Streptomycessp. 中文名稱:鏈霉菌Streptomycessp.分離基物:泥安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:156生長條件:28℃ 純度:99%
大腸桿菌克隆菌 中文名稱:TG1 Strain大腸桿菌克隆菌提供形式:甘油菌 100μl模式菌株:未知應用領域:基因型F' [traD36 proAB+ lacIq lacZΔM15]supE thi-1Δ(lac-proAB) Δ(mcrB-hsdSM)5 (rK-mK-)培養(yǎng)方法存儲條件:-20℃ 純度:96%
硝基酪氨酸(NT)檢測試劑盒Cetrimide agar Pseudomomas selective agar (base)人氣管上皮裂解物4'--2'-羥基苯乙r-GST(Recombinant Glutathione S-T Ahents) 重組谷胱甘肽轉移酶GST標簽蛋白
溴棕銨瓊脂/假單胞菌選擇培養(yǎng)基人氣道上皮裂解物4'--2'-羥基苯乙P4(Caspase-4) 半胱胺蛋白酶蛋白-4抗原
CHAPMAN agar Staphylococcus selective agar 11 acc.to CHAPMAN人肺成纖維裂解物1-芐基-3-Trk B 神經生長因子受體的一種(抗原)
查普曼瓊脂/葡萄狀球菌選擇瓊脂人支氣管平滑肌裂解物1-芐基-3-GDF8/MSTN(growth differntiation factor 8) 重組生長分化因子8/肌肉抑制素
China blue-lactose agar 中國藍乳糖瓊脂人氣管平滑肌裂解物2,5-二溴-3-十二烷基噻吩Trk B 神經生長因子受體的一種(抗原)
Reinforced clostridial agar(RCM)梭狀芽孢桿菌加強瓊脂人骨骼肌裂解物2,5-二溴-3-十二烷基噻吩Insulin protein (Active) 重組人胰島素因子
Differential reinforced clostridial broth 梭狀芽孢桿菌鑒別加強肉湯人骨骼肌衛(wèi)生裂解物(S)-(+)-2,3-二氨基 鹽鹽Trk C 神經生長因子受體的一種(抗原)
Reinforced clostridial medium(RCM)梭狀芽孢桿菌加強培養(yǎng)基人骨骼肌成肌裂解物(S)-(+)-2,3-二氨基 鹽鹽TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(NT) 促甲狀腺素受體(抗原)