ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作，必能得出準確的實驗結(jié)果，可提供免費技術(shù)咨詢服務！
產(chǎn)品名稱 | PKB人蛋白激酶BELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human protein kinase B, PKB Elisa Kit |
貨號 | FS-H63952 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿，細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
鴨細病核快速診斷試劑盒 PCR法AntiNFH 0.1ml
Nunc 免疫管（Immuno Tube）AntiNFKBp65 0.1ml
貂源性成分快速鑒別試劑盒 實時熒光PCR法AntiNFL 0.1ml
狐貍源性成分快速鑒別試劑盒 實時熒光PCR法AntiNFM 0.1ml
兔源性成分快速鑒別試劑盒 實時熒光PCR法AntiNFκBp50 0.1ml
鵝源性成分快速鑒別試劑盒 實時熒光PCR法AntiNGFR/p75/CD271 0.1ml
鴨源性成分快速鑒別試劑盒 實時熒光PCR法AntiNGFβ 0.1ml
Estradiol, E2 Elisa Kit蝶（標準品）Human/人Elisa試劑盒規(guī)格：48T
Estradiol, E2 Elisa Kit拉呋替丁Human/人Elisa試劑盒規(guī)格：96T
Dehydroepiandrosterone sulfate, DHEAS Elisa Kit 拉呋替?。藴势罚〩uman/人Elisa試劑盒規(guī)格：48T
Dehydroepiandrosterone sulfate, DHEAS Elisa Kit 可索侖/維生素E聚二琥珀酯Human/人Elisa試劑盒規(guī)格：96T
Testoterone, T Elisa Kit甲那明Human/人Elisa試劑盒規(guī)格：48T
Testoterone, T Elisa Kit羅沙替丁醋酯Human/人Elisa試劑盒規(guī)格：96T
Free Testoterone, FTESTO Elisa Kit培美曲塞Human/人Elisa試劑盒規(guī)格：48T
Free Testoterone, FTESTO Elisa Kit培美曲塞(標準品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格：96T
Androstenedione, ASD Elisa Kit周效磺(磺多辛)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格：48T
Androstenedione, ASD Elisa Kit周效磺(標準品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格：96T
Estriol, E3 Elisa Kit青G鈉Human/人Elisa試劑盒規(guī)格：48T
Estriol, E3 Elisa Kit青G鈉(標準品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格：96T
17Hydroxyprogesterone, 17OHP Elisa Kit米格列奈鈣Human/人Elisa試劑盒規(guī)格：48T
17Hydroxyprogesterone, 17OHP Elisa Kit米格列奈鈣(標準品)Human/人Elisa試劑盒規(guī)格：96T
Triiodothyronine, T3 Elisa Kit基嘧 /6正基2代尿嘧Human/人Elisa試劑盒規(guī)格：48T
Triiodothyronine, T3 Elisa Kit米龍醋酯Human/人Elisa試劑盒規(guī)格：96T
血板衍生生長因子BB(PDGF-BB)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
腺病3(ADV3)抗體(IgG)酶聯(lián)免疫試劑盒 Human ADV3 IgG ELISA Kit
丙二(MDA)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
RatMotilin,MTL酶聯(lián)免疫試劑盒胃動素(MTL)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumanHepatitisCvirusIgM,HCV-IgM酶聯(lián)免疫試劑盒丙型肝炎IgM(HCV-IgM)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumanL-SelectinELISAKitL選擇素(L-Selectin/CD62L)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
β神經(jīng)生長因子(β-NGF)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
核因子κB(NF-κB)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit Nuclear factor-kappa B,NF-κB Elisa Kit
沙眼衣原體抗原(CT)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： CT ELISA Kit
PorcinelisteriolysinO,LLO酶聯(lián)免疫試劑盒單核增多性李斯特菌素O((LLO)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumanAlpha-fetoprotein,AFP酶聯(lián)免疫試劑盒種胎兒球蛋白/胎蛋白(AFP)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
HumanAquaporin0,AQP-0ELISAKit水通道蛋白0(AQP-0)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
PKB人蛋白激酶BELISA試劑盒實驗原理CD34/RBITC 紅色熒光素羅丹明標記CD34抗體IgG磷化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導蛋白抗體8-溴腺苷Mouse PDPN (Podoplanin) ELISA Kit
CD44/FITC 熒光素標記CD44抗體IgG磷化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導蛋白抗體2-巰基-5-甲基-1,3,4-噻二唑（MMTD）Mouse NFκB2 (Nuclear Factor Kappa B2) ELISA Kit
CD43/SPN/FITC 熒光素標記CD43抗體IgG磷化B-Raf抗體2-巰基-5-甲基-1,3,4-噻二唑（MMTD）Mouse BMG/β2-MG (Beta-2-Microglobulin) ELISA Kit
CD44/RBITC 紅色熒光素羅丹明標記CD44抗體IgG磷化B-Raf抗體2-巰基-5-甲基-1,3,4-噻二唑（MMTD）Mouse NPHN (Nephrin) ELISA Kit
CD44v4 /FITC 熒光素標記兔抗人、大、鼠CD44V4抗體IgG磷化Bcl-xL蛋白抗體羥胺-O-磺Mouse AFGF/FGF1 (Acidic Fibroblast Growth Factor 1) ELISA Kit
CD44v5 /FITC 熒光素標記兔抗人、大、鼠CD44V5抗體IgG高表達神經(jīng)上皮蛋白BTG3抗體羥胺-O-磺Mouse FGF19 (Fibroblast Growth Factor 19) ELISA Kit
CD44V6/CD44/HCAM/FITC 熒光素標記抗CD44抗體IgGB遷移基因4抗體羥胺-O-磺Mouse FGF23 (Fibroblast Growth Factor 23) ELISA Kit
CD44v7 /FITC 熒光素標記兔抗人、大、鼠CD44V7抗體IgGBCL2相互作用蛋白質(zhì)抗體1,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷Mouse FGFR1 (Fibroblast Growth Factor Receptor 1) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
