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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | IFN-β/IFNB人β干擾素ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Interferon β, IFN-β/IFNB Elisa Kit |
貨號 | FS-H63217 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Leuconostoc│lactis 乳明串珠菌Leuconostoc│lactis凍干物安全等級:1模式菌株:no用于發(fā)酵乳品研究CM0006生長條件:25℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98.5%
Paenibacillus│lactis 乳類芽孢桿菌Paenibacillus│lactis凍干物安全等級:1模式菌株:no產(chǎn)β-淀酶。CM0002生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:AR,3-10目,2-7mm
Sporobolomyces│salomonicolor 赭色擲孢酵母Sporobolomyces│salomonicolor凍干物安全等級:1模式菌株:noCM0077生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98%
Mucor spinosus 囊毛霉Mucor spinosus凍干物安全等級:1模式菌株:no綜合PDA瓊脂:馬鈴薯煮液 1.0L,葡萄糖 20.0g,KH2PO4 3.0g,MgSO4·7H2O 1.5g,維生素B1 微量,瓊脂 20.0g,pH 6.0±0.2。生長條件:28℃,好氧,7d存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98%
Candida│shehatae var. shehatae 休哈塔假絲酵母休哈塔亞種Candida│shehatae var. shehatae分離基物:棘草花金龜體內(nèi)凍干物安全等級:1模式菌株:noCM0077生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Trichoderma│asperellum 棘孢木霉Trichoderma│asperellum凍干物安全等級:1模式菌株:no野生植物制酒。CM0015生長條件:25-28℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:99%
Trichoderma│longibrachiatum 長枝木霉Trichoderma│longibrachiatum凍干物安全等級:1模式菌株:noCM0014生長條件:25-28℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:97%
Eurotium│rubrum 赤散囊菌Eurotium│rubrum分離基物:雙望目鏡凍干物安全等級:1模式菌株:noCM0077生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:97%
IFN-β/IFNB人β干擾素ELISA試劑盒實驗原理戊烷脒多粘菌素B瓊脂基礎(chǔ)人胃平滑肌肺成纖維Biotin/BSA 生物素偶聯(lián)牛血清白蛋白
碳?xì)溻c瓊脂基礎(chǔ)人腸微血管內(nèi)皮心肌ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(18-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素(18-39)(抗原)
指示選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)人腸平滑肌心肌成纖維SP (Substance P) P物質(zhì)(抗原)
PLET瓊脂基礎(chǔ)人結(jié)腸微血管內(nèi)皮主動脈內(nèi)皮Ghrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽)多肽抗原
快速硫化氫試驗瓊脂人結(jié)腸平滑肌主動脈平滑肌Gastrin(human)peptide(1-17) 胃泌素/蛙皮素(多肽人源)
DNA酶甲基綠瓊脂基礎(chǔ)人直腸平滑肌單核myelin P0 prothein( peripheral myelin prothein Zero;MPZ;MPP) 外周髓鞘蛋白0(P0蛋白)多肽抗原
甘露卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)(MYP)人肺微血管內(nèi)皮大隱靜脈平滑肌Insulin protein (from porcine pancreas) 豬胰島素
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ)人肺微血管內(nèi)皮-食管上皮bovine Insulin protein 牛胰島素蛋白