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產(chǎn)品名稱:NI中性轉(zhuǎn)化酶檢測試劑盒微量法
規(guī)格:100管/48樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63591
商品介紹:
測定意義 蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)最適 pH,將高等植物Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型。 NI主要存在于細胞質(zhì)中,負責分解細胞質(zhì)中蔗糖為果糖和葡萄糖。 測定原理: NI催化蔗糖分解產(chǎn)生還原糖,進一步與3,5-二硝基水楊酸反應,生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計算NI活性 自備用品: 可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
1、細胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
雞雌二受體(ER)試劑盒 Anti-CLEC11A Antibody促卵泡受體抗原
雞胃泌抑制肽(GIP)試劑盒 Anti-CLDN8 Antibody促卵泡抗原
雞黑色瘤標記物(MART/Melan-A)試劑盒Anti-CLEC3B Antibodyγ1基丁A型受體α1抗原
雞轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGF-β3)試劑盒 Anti-CLIC3 Antibodyg-基丁B1受體(多肽)
雞碳酐IX (CA9)試劑盒Anti-CLEC4M Antibodyγ1基丁A型受體B2抗原
雞硒蛋白1(SEP1)試劑盒Anti-CLEC4A Antibody谷脫羧-67抗原
雞內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)試劑盒Anti-CLIP2 Antibody生長抑制DNA損傷基因153抗原
雞間隙連接蛋白37(CX37)試劑盒 Anti-CLIC6 Antibody磷化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白43抗原
雞鳥苷結(jié)合蛋白4(GBP4)試劑盒 Anti-CLIP3 Antibody3-磷甘油脫氫()抗原
雞血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)試劑盒Anti-CLK2 Antibody表面趨化因子受體3抗原
雞髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)試劑盒 Anti-CLIP4 AntibodyGATA結(jié)合蛋白3抗原
雞間隙連接蛋白31(CX31)試劑盒 Anti-CLK1 AntibodyGATA結(jié)合蛋白4抗原
雞B瘤因子2(Bcl-2)試劑盒Anti-CLK4 Antibody生長終止特異性同源盒基因抗原
雞G蛋白偶聯(lián)受體120(GPR120)試劑盒Anti-CLN5 Antibody生長分化因子8抗原
雞腫瘤特異性移植抗原(TSTA)試劑盒 Anti-CLN5 Antibody膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗原
NI中性轉(zhuǎn)化酶檢測試劑盒微量法樣蛋白2抗體Human IL-17E/IL-25(Interleukin 25) ELISA Kit大鼠Ⅰ型膠原elisa檢測試劑盒說明書
SNF1/AMP激相關(guān)激2抗體Human IL-31(Interleukin-31) ELISA Kit大鼠β-防御elisa檢測試劑盒品牌
雞新城疫疫苗(雞瘟4型混合病)抗體Human IGFBP-1(Insulin-like growth factor-binding protein 1) ELISA Kit大鼠蛋白磷elisa檢測試劑盒說明書
神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白1抗體Human IL-1alpha(Interleukin 1 Alpha) ELISA Kit大鼠趨化因子elisa檢測試劑盒品牌
神經(jīng)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體Human IL-1beta(Interleukin 1 Beta) ELISA Kit大鼠基質(zhì)金屬蛋白1elisa檢測試劑盒多少錢
神經(jīng)轉(zhuǎn)化2抗體Human GDF15(Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit大鼠骨形成蛋白6elisa檢測試劑盒哪里有買
神經(jīng)肽W抗體Human IL1R1(Interleukin 1 Receptor Type I) ELISA Kit大鼠組織蛋白Kelisa檢測試劑盒多少錢
神經(jīng)肽Y受體5抗體Human FCN2(Ficolin-2) ELISA Kit大鼠多巴轉(zhuǎn)運蛋白elisa檢測試劑盒品牌