ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | U S-GH人超敏生長激素ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Ultra Sensitive growth hormone, U S-GH Elisa Kit |
貨號 | FS-H63604 |
公司“質量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Purpureocillium│sp. Purpureocillium sp.Purpureocillium│sp.分離基物:土壤斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no抗大腸桿菌CM0014生長條件:25C存儲條件:液氮超低溫凍結;-80℃冰箱凍結 純度:≥99%
Sacchardthrix│australienis 澳大利亞糖絲菌Sacchardthrix│australienis凍干物安全等級:1模式菌株:no研究CM0011生長條件:28C存儲條件:真空冷凍干燥 純度:98%
Escherichia│coli 大腸埃希氏菌DH5a/EcsecA N68Escherichia│coli斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no保存表達大腸桿菌SecA蛋白N端68kDa基因的基因工程細菌CM0033生長條件:37C存儲條件:液氮超低溫凍結 純度:98%
Escherichia│coli 大腸埃希氏菌DH5a/T/TBsecA2Escherichia│coli斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no保存表達結核分枝桿菌SecA2蛋白基因的基因工程細菌CM0033生長條件:37C存儲條件:液氮超低溫凍結 純度:95%
Ustilago│sp. 黑菌屬Ustilago│sp.凍干物安全等級:1模式菌株:no活性物質CM0015生長條件:28C存儲條件:真空冷凍干燥 純度:95%
Phaeospirillum│sp. 紅螺菌屬菌種Phaeospirillum│sp.分離基物:土壤凍干物安全等級:1模式菌株:noCM0027生長條件:28C存儲條件:真空冷凍干燥 純度:90%
Saccharomyces│cerevisiae 啤酒酵母Saccharomyces│cerevisiae斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:noCM0015生長條件:26-28C存儲條件:定期移植法 純度:90%
Fusarium│solani var.coeruleum 茄病鐮刀菌藍色變種Fusarium│solani var.coeruleum分離基物:人參根部土壤凍干物安全等級:1模式菌株:noCM0014生長條件:28C存儲條件:真空冷凍干燥 純度:98%
U S-GH人超敏生長激素ELISA試劑盒實驗原理IL-23R 白介素-23受體抗體一枝黃花4-芐氧基吲哚Human TIMP-4 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 4) ELISA Kit
IL-19/NG.1 白介素-19抗體垂盆草7-芐氧基吲哚Human LGALS3BP (Lectin Galactoside Binding, Soluble 3 Binding Protein) ELISA Kit
IL-20R alpha/IL20RA 白介素20受體α鏈抗體牛至7-芐氧基吲哚Human MAT (Matrilysin) ELISA Kit
IL-20RB/IL-20R2 白介素20受體β鏈抗體薊2-吡 N-氧化物 鹽鹽Human TNNI2 (Troponin I Type 2, Fast Skeletal) ELISA Kit
IL-21 白介素21抗體肉桂葉(S,S)-1,2-雙[(叔丁基)甲基膦]乙烷[η-(2,5-二環(huán)庚二烯)]合四銠(I)Human TP/TXA2R (Thromboxane Receptor) ELISA Kit
IL-21R 白介素21受體抗體黑老虎7-Methoxycoumarin-3-carboxylic acidHuman SDF-2 (Stromal Cell Derived Factor 2) ELISA Kit
IL-22 白介素-22抗體土茯苓氘代正戊烷-d12Human SDF2L1 (Stromal Cell Derived Factor 2 Like Protein 1) ELISA Kit
IL-22R 白介素-22受體抗體胡椒(黑胡椒)基乙縮二乙Human SDF-4 (Stromal Cell Derived Factor 4) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準